बैक्टीरिया के एंटीजन. सूक्ष्मजीवों के एंटीजन, एंटीजेनिक संरचना द्वारा बैक्टीरिया की पहचान

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परिचय।पहचान- सूक्ष्म जीव की प्रजाति का निर्धारण (स्थापना)। वर्तमान में, आम तौर पर स्वीकृत पहचान पद्धति अध्ययन के तहत सूक्ष्मजीव की सबसे महत्वपूर्ण फेनोटाइपिक विशेषताओं के एक निश्चित सेट के अध्ययन पर आधारित है। पहचान के लिए मानदंड किसी दिए गए प्रजाति (टैक्सोमेट्रिक विशेषताओं) की बुनियादी विशेषताओं के एक सेट के सूक्ष्म जीव में उपस्थिति है। प्रजाति की स्थापना बैक्टीरिया के अंतर्राष्ट्रीय वर्गीकरण (बर्गीज़ मैनुअल ऑफ़ सिस्टमैटिक बैक्टीरियोलॉजी) के अनुसार की गई है।

को मुख्य प्रजाति की विशेषताएंबैक्टीरिया में शामिल हैं:

माइक्रोबियल कोशिका की आकृति विज्ञान;

टिंक्टोरियल गुण - सरल और जटिल रंग विधियों का उपयोग करके रंग भरने की विशेषताएं;

सांस्कृतिक विशेषताएं - पोषक तत्व मीडिया पर सूक्ष्मजीव विकास की विशेषताएं;

वीजैव रासायनिक विशेषताएं - विभिन्न रासायनिक यौगिकों के संश्लेषण या टूटने (किण्वन) के लिए आवश्यक एंजाइमों के बैक्टीरिया में उपस्थिति।

बैक्टीरियोलॉजिकल अभ्यास में, सैकेरोलाइटिक और प्रोटीयोलाइटिक एंजाइमों का सबसे अधिक अध्ययन किया जाता है।

को अतिरिक्त संकेत,पहचान के लिए उपयोग में शामिल हैं:

प्रजाति-विशिष्ट प्रतिजनों की उपस्थिति (अध्याय 10 देखें);

प्रजाति-विशिष्ट बैक्टीरियोफेज के प्रति संवेदनशीलता (अध्याय 5 देखें);


कुछ रोगाणुरोधकों के प्रति प्रजाति-विशिष्ट प्रतिरोध (अध्याय 8 देखें);

रोगजनक बैक्टीरिया के लिए - कुछ विषाणु कारकों का उत्पादन (अध्याय 9 देखें)।

बायोवर (सेरोवा-रा, फागोवर, फेरमेंटोवर, आदि) की बारीक अंतःविशिष्ट पहचान - अनुमापन -संबंधित मार्कर की पहचान पर आधारित है: एंटीजन (सीरोटाइपिंग, अध्याय 10 देखें), एक विशिष्ट बैक्टीरियोफेज के प्रति संवेदनशीलता (फेज टाइपिंग, अध्याय 5 देखें), आदि।

हाल के वर्षों में, आधुनिक जैव रासायनिक और आणविक जैविक पहचान विधियों का विकास और उपयोग किया जाने लगा है: कीमोआइडेंटिफिकेशन, न्यूक्लिक एसिड विश्लेषण: प्रतिबंध विश्लेषण, संकरण, पोलीमरेज़ चेन रिएक्शन (पीसीआर), राइबोटाइपिंग, आदि।

शिक्षण योजना

कार्यक्रम

1. बैक्टीरिया की पहचान.

2. एरोबिक और एनारोबिक बैक्टीरिया के जैव रासायनिक गुणों का अध्ययन।

▲ प्रदर्शन

1. गैर वरीयता प्राप्त "विभिन्न प्रकार की पंक्ति"।

2. "विभिन्न पंक्ति" को बदलने के विकल्प।

3. अवायवीय जीवाणुओं के लिए "मोटली पंक्ति"।

4. बैक्टीरिया के जैव रासायनिक गुणों का अध्ययन करने की सूक्ष्म विधि।

5. रंगद्रव्य उत्पन्न करने वाले जीवाणुओं की वृद्धि।

छात्रों के लिए असाइनमेंट

1. "विभिन्न पंक्ति" को बदलने के लिए स्केच विकल्प।

2. शुद्ध संस्कृति की जांच के परिणामों का मूल्यांकन करें: बीजित संस्कृति की वृद्धि की उपस्थिति या अनुपस्थिति, साथ ही विदेशी बैक्टीरिया की उपस्थिति पर ध्यान दें।


3. सुनिश्चित करें कि पृथक संस्कृति शुद्ध है; ऐसा करने के लिए, एक स्मीयर तैयार करें और इसे ग्राम विधि का उपयोग करके दाग दें।

4. कांच पर कैटालेज़ परीक्षण रखें और उसके परिणाम का मूल्यांकन करें।

5. पृथक शुद्ध संस्कृतियों की जैव रासायनिक गतिविधि का निर्धारण करने के परिणामों को ध्यान में रखें।

6. एक गाइड तालिका का उपयोग करते हुए, अध्ययन किए गए रूपात्मक, टिनक्टोरियल, सांस्कृतिक और एंजाइमैटिक गुणों के आधार पर, पृथक रोगाणुओं की पहचान करें।

▲ दिशानिर्देश

जैव रासायनिक पहचान.बैक्टीरिया की जैव रासायनिक गतिविधि का आकलन करने के लिए, निम्नलिखित का उपयोग किया जाता है: प्रतिक्रियाएँ:

1) किण्वन - सब्सट्रेट का अधूरा टूटना

मध्यवर्ती उत्पाद, जैसे कार्बनिक अम्लों के निर्माण के साथ कार्बोहाइड्रेट का किण्वन;

2) ऑक्सीकरण - कार्बनिक सब्सट्रेट का C0 2 और H2O में पूर्ण विघटन;

3) आत्मसात (उपयोग) - कार्बन या नाइट्रोजन के स्रोत के रूप में विकास के लिए सब्सट्रेट का उपयोग;

4) सब्सट्रेट का विघटन (गिरावट);

5) सब्सट्रेट का हाइड्रोलिसिस।

जैव रासायनिक विशेषताओं द्वारा रोगाणुओं की पहचान करने की शास्त्रीय (पारंपरिक) विधि में किसी दिए गए सब्सट्रेट को आत्मसात करने या उसके चयापचय के अंतिम उत्पादों को निर्धारित करने के लिए सूक्ष्मजीव की क्षमता का आकलन करने के लिए कुछ सब्सट्रेट वाले विभेदक निदान मीडिया पर एक शुद्ध संस्कृति का टीका लगाना शामिल है। अध्ययन में कम से कम 1 दिन लगता है। एक उदाहरण हिस मीडिया पर टीकाकरण का उपयोग करके बैक्टीरिया की चीनी-रोलिटिक गतिविधि (कार्बोहाइड्रेट को किण्वित करने की क्षमता) का आकलन है - एक छोटी और लंबी "विभिन्न पंक्ति"।

"विभिन्न श्रृंखला" मीडिया का उपयोग करके जैव रासायनिक विशेषताओं द्वारा बैक्टीरिया की पहचान। लघु "विविध श्रृंखला" में मोनो- और डिसैकराइड के साथ तरल हिस मीडिया शामिल है: ग्लूकोज, लैक्टोज, सुक्रोज, माल्टोज और 6-हाइड्रिक अल्कोहल - मैनिटोल। सूचीबद्ध कार्बोहाइड्रेट के साथ, विभिन्न मोनोसेकेराइड (अरेबिनोज, ज़ाइलोज़, रैम्नोज़, गैलेक्टोज़, आदि) और अल्कोहल (ग्लिसरॉल, डुलसाइट, इनोसिटोल, आदि) वाले मीडिया को लंबी "विविध पंक्ति" में पेश किया जाता है। कार्बोहाइड्रेट को किण्वित करने के लिए बैक्टीरिया की क्षमता का आकलन करने के लिए, अम्लीय टूटने वाले उत्पादों (कार्बनिक एसिड) के गठन का पता लगाने के लिए मीडिया में एक संकेतक (एंड्रेडे अभिकर्मक या अन्य) जोड़ा जाता है, और रिलीज का पता लगाने के लिए एक "फ्लोट" जोड़ा जाता है।

2 के साथ.

अध्ययन के तहत सूक्ष्मजीव की एक शुद्ध संस्कृति को "विभिन्न पंक्ति" मीडिया में एक लूप के साथ टीका लगाया जाता है। फसलों को 18-24 घंटे या उससे अधिक समय के लिए 37 डिग्री सेल्सियस पर ऊष्मायन किया जाता है। यदि बैक्टीरिया अम्लीय उत्पाद बनाने के लिए कार्बोहाइड्रेट को किण्वित करते हैं, तो माध्यम के रंग में परिवर्तन देखा जाता है; जब कार्बोहाइड्रेट एसिड और गैसीय उत्पादों में विघटित हो जाता है, साथ ही रंग में परिवर्तन, फ्लोट में एक गैस बुलबुला दिखाई देता है यदि अर्ध-तरल अगर वाले मीडिया का उपयोग किया जाता है, तो गैस के गठन का पता स्तंभ में एक दरार से लगाया जाता है। किण्वन की अनुपस्थिति में, माध्यम का रंग नहीं बदलता है। चूंकि बैक्टीरिया सभी को किण्वित नहीं करते हैं, बल्कि प्रत्येक प्रकार के लिए केवल कुछ कार्बोहाइड्रेट को किण्वित करते हैं, जो कि हिस मीडिया का हिस्सा हैं, एक बल्कि रंगीन तस्वीर देखी जाती है, इसलिए कार्बोहाइड्रेट और एक रंग संकेतक के साथ मीडिया के एक सेट को "विभिन्न श्रृंखला" कहा जाता है (चित्र) .3.2.1; इनसेट).

के लिए प्रोटीयोलाइटिक एंजाइमों का निर्धारणएक बैक्टीरियल कल्चर को एक कॉलम में 10-20% जिलेटिन इंजेक्ट करके टीका लगाया जाता है,


पेप्टोन पानी. जिलेटिन में फसलें कई दिनों तक 20-22 डिग्री सेल्सियस पर इनक्यूबेट की जाती हैं। प्रोटियोलिटिक एंजाइमों की उपस्थिति में, बैक्टीरिया जिलेटिन को द्रवीभूत करते हैं, जिससे फ़नल या हेरिंगबोन जैसा आकार बनता है।

पेप्टोन पानी* में फसलों में, अमीनो एसिड टूटने के उत्पादों को सेटिंग द्वारा 37 डिग्री सेल्सियस पर 2-3 दिनों के लिए ऊष्मायन के बाद निर्धारित किया जाता है अमोनिया, इंडोल, हाइड्रोजन सल्फाइड पर प्रतिक्रियाएँऔर आदि।

अमोनिया पर प्रतिक्रिया. लिटमस पेपर की एक संकीर्ण पट्टी स्टॉपर के नीचे सुरक्षित की जाती है ताकि यह पोषक माध्यम के संपर्क में न आए। कागज का नीला रंग अमोनिया के बनने का संकेत देता है।

इण्डोल की प्रतिक्रिया. एर्लिच की विधि: बैक्टीरियल कल्चर के साथ एक टेस्ट ट्यूब में 2-3 मिलीलीटर ईथर डालें, सामग्री को सख्ती से मिलाएं और एर्लिच के अभिकर्मक (हाइड्रोक्लोरिक एसिड के साथ पैराडिमिथाइलमिडोबेंज़ाल्डिहाइड का एक अल्कोहल समाधान) की कुछ बूंदें जोड़ें। इंडोल की उपस्थिति में, एक गुलाबी रंग देखा जाता है; सावधानीपूर्वक परत लगाने पर, एक गुलाबी अंगूठी बनती है (चित्र 3.2.1 देखें)।

हाइड्रोजन सल्फाइड पर प्रतिक्रिया। फेरस सल्फेट से सिक्त फिल्टर पेपर की एक संकीर्ण पट्टी को पेप्टोन पानी के साथ एक टेस्ट ट्यूब में रखा जाता है और स्टॉपर के नीचे सुरक्षित किया जाता है ताकि यह पोषक माध्यम के संपर्क में न आए। जब हाइड्रोजन सल्फाइड छोड़ा जाता है, तो अघुलनशील आयरन सल्फाइड (FeS) बनता है, जो कागज को काला कर देता है (चित्र 3.2.1 देखें)। एच 2 एस का उत्पादन एच 2 एस (लवण का मिश्रण: फेरस सल्फेट, सोडियम थायोसल्फेट, सोडियम सल्फाइट) का पता लगाने के लिए अभिकर्मकों वाले पोषक माध्यम के साथ एक कॉलम में जीवाणु संस्कृति को टीका लगाकर भी निर्धारित किया जा सकता है। सकारात्मक परिणाम - FeS बनने के कारण माध्यम काला हो जाता है।

कैटालेज़ का पता लगाना। 1-3% हाइड्रोजन पेरोक्साइड घोल की एक बूंद कांच की स्लाइड पर लगाई जाती है और उसमें बैक्टीरिया कल्चर वाला एक लूप डाला जाता है। कैटालेज़ हाइड्रोजन पेरोक्साइड को ऑक्सीजन और पानी में विघटित करता है। गैस के बुलबुले का निकलना इस प्रकार के बैक्टीरिया में कैटालेज़ की उपस्थिति को इंगित करता है।

बैक्टीरियोलॉजिकल अभ्यास में, वे कभी-कभी अध्ययन के तहत बैक्टीरिया की सैकेरोलाइटिक और प्रोटियोलिटिक विशेषताओं का अध्ययन करने तक ही सीमित होते हैं, यदि यह उनकी पहचान के लिए पर्याप्त है। यदि आवश्यक हो, तो अन्य विशेषताओं की जांच करें, जैसे नाइट्रेट, कार्बोक्जलेट अमीनो एसिड को कम करने की क्षमता, ऑक्सीडेज, प्लाज़्माकोएगुलेज़, फाइब्रिनोलिसिन और अन्य एंजाइम बनाने की क्षमता।

पृथक संस्कृति की पहचान करने के कार्य के परिणाम दर्ज किए गए हैं (तालिका 3.2.1)।

अंतिम प्रतिक्रिया उत्पादों का पता लगाने के लिए संकेंद्रित सब्सट्रेट्स और अधिक संवेदनशील तरीकों के उपयोग पर आधारित दूसरी पीढ़ी के जैव रासायनिक परीक्षण,

शिक्षा के लिए संघीय एजेंसी

बायिस्क टेक्नोलॉजिकल इंस्टीट्यूट (शाखा)

राज्य शैक्षणिक संस्थान

पाठ्यक्रमों में "सामान्य जीव विज्ञान और सूक्ष्म जीव विज्ञान", "सूक्ष्म जीव विज्ञान" विशिष्टताओं के छात्रों के लिए 240901 "जैव प्रौद्योगिकी",
260204 "किण्वन उत्पादन और वाइनमेकिंग की तकनीक"
शिक्षा के सभी प्रकार

यूडीसी 579.118:579.22

कमेंस्काया, सूक्ष्मजीव: "सामान्य जीवविज्ञान" पाठ्यक्रमों में प्रयोगशाला कार्य के लिए पद्धति संबंधी सिफारिशें
और माइक्रोबायोलॉजी", "माइक्रोबायोलॉजी" विशिष्टताओं के छात्रों के लिए 240901 "जैव प्रौद्योगिकी", 260204 शिक्षा के सभी रूपों के "किण्वन उत्पादन और वाइनमेकिंग की तकनीक" /,
.

Alt. राज्य तकनीक. विश्वविद्यालय, बीटीआई। - बायिस्क:

प्रकाशन गृह ऑल्ट. राज्य तकनीक. विश्वविद्यालय, 2007.-36 पी.

ये दिशानिर्देश सूक्ष्मजीवों के वर्गीकरण और पहचान की बुनियादी अवधारणाओं, नियमों और सिद्धांतों पर चर्चा करते हैं। बैक्टीरिया के तनाव का वर्णन करने और इसे जीनस स्तर तक पहचानने के लिए आवश्यक बैक्टीरिया के विभिन्न गुणों का अध्ययन करने के लिए प्रयोगशाला कार्य प्रस्तुत किया जाता है।

समीक्षा की गई और अनुमोदित किया गया

एक विभाग की बैठक में

"जैव प्रौद्योगिकी"।

01/01/2001 का प्रोटोकॉल नंबर 88

समीक्षक:

डॉक्टर ऑफ बायोलॉजिकल साइंसेज, प्रोफेसर, बीपीएसयू के नाम पर रखा गया।

© बीटीआई अल्टएसटीयू, 2007

© , 2007

1 बुनियादी अवधारणाएँ और नाम नियम

सूक्ष्मजीवों

सूक्ष्मजीवों की कई हजार प्रजातियों का वर्णन किया गया है, लेकिन ऐसा माना जाता है कि यह 1 से भी कम का प्रतिनिधित्व करता है % उनसे जो वास्तव में अस्तित्व में हैं। सूक्ष्मजीवों की विविधता का अध्ययन वर्गीकरण का विषय है। इसका मुख्य कार्य सूक्ष्मजीवों के फ़ाइलोजेनेटिक संबंधों को प्रतिबिंबित करने वाली एक प्राकृतिक प्रणाली बनाना है। हाल तक, सूक्ष्मजीवों का वर्गीकरण मुख्य रूप से फेनोटाइपिक विशेषताओं पर आधारित था: रूपात्मक, शारीरिक, जैव रासायनिक, आदि, इसलिए मौजूदा वर्गीकरण प्रणाली काफी हद तक कृत्रिम हैं। हालाँकि, वे सूक्ष्मजीवों के कुछ नए पृथक उपभेदों की पहचान करना अपेक्षाकृत आसान बनाते हैं।

वर्गीकरण में ऐसे अनुभाग शामिल हैं वर्गीकरण, नामकरण और ईडन चना . वर्गीकरण उस क्रम को निर्धारित करता है जिसमें एक निश्चित डिग्री की एकरूपता वाले व्यक्तियों को कुछ समूहों (टैक्स) में रखा जाता है। नामपद्धति टैक्सा के नामकरण के लिए नियमों का एक सेट है। पहचान इसका अर्थ यह निर्धारित करना है कि अध्ययनाधीन जीव किसी विशेष टैक्सोन से संबंधित है या नहीं।

शब्द "टैक्सोनॉमी" का उपयोग अक्सर सिस्टमैटिक्स के पर्याय के रूप में किया जाता है, लेकिन कभी-कभी इसे सिस्टमैटिक्स के एक खंड के रूप में समझा जाता है, जिसमें वर्गीकरण का सिद्धांत, टैक्सोनोमिक श्रेणियों, सीमाओं और कर की अधीनता की प्रणाली का अध्ययन शामिल है। अन्य जैविक विज्ञानों की तरह, सूक्ष्म जीव विज्ञान में मुख्य वर्गीकरण श्रेणी है देखना- कई सामान्य रूपात्मक, शारीरिक, जैव रासायनिक और आणविक आनुवंशिक विशेषताओं वाले व्यक्तियों का एक समूह।

शब्द "स्ट्रेन" एक विशिष्ट निवास स्थान (पानी, मिट्टी, पशु शरीर, आदि) से अलग किए गए सूक्ष्मजीव की शुद्ध संस्कृति को संदर्भित करता है। एक ही प्रकार के सूक्ष्मजीवों के विभिन्न उपभेद कुछ विशेषताओं में भिन्न हो सकते हैं, उदाहरण के लिए, एंटीबायोटिक दवाओं के प्रति संवेदनशीलता, कुछ चयापचय उत्पादों को संश्लेषित करने की क्षमता, आदि, लेकिन ये अंतर प्रजाति-विशिष्ट से कम हैं। सूक्ष्म जीव विज्ञान और आनुवंशिकी में "तनाव" की अवधारणा कुछ अलग है: सूक्ष्म जीव विज्ञान में यह अवधारणा व्यापक है। सूक्ष्मजीवों के प्रकारों को उच्च क्रम की वर्गीकरण श्रेणियों में बांटा गया है: जेनेरा, परिवार, ऑर्डर, वर्ग, डिवीजन, साम्राज्य। इन श्रेणियों को अनिवार्य कहा जाता है। वैकल्पिक श्रेणियां भी हैं: उपवर्ग, उपवर्ग, उपपरिवार, जनजाति, उपजनजाति, उपजाति, उपप्रजाति। हालाँकि, वर्गीकरण में, वैकल्पिक श्रेणियों का उपयोग बहुत कम किया जाता है।

सूक्ष्मजीवों का नामकरण अंतरराष्ट्रीय नियमों के अधीन है। इस प्रकार, बैक्टीरिया के नामकरण की अंतर्राष्ट्रीय संहिता है। यीस्ट कवक के लिए, मुख्य मार्गदर्शिका "द यीस्ट्स" है। फिलामेंटस कवक और शैवाल के लिए एक वर्गीकरण अध्ययन - वानस्पतिक नामकरण का अंतर्राष्ट्रीय कोड।

सूक्ष्म जीव विज्ञान में वस्तुओं को नाम देने के लिए, जैसे प्राणीशास्त्र और वनस्पति विज्ञान में, वे बाइनरी या द्विपद (अक्षांश से) का उपयोग करते हैं। बीआईएस- दो बार) नामकरण की एक प्रणाली, जिसके अनुसार प्रत्येक प्रजाति का एक नाम होता है जिसमें दो लैटिन शब्द होते हैं। पहले शब्द का अर्थ जीनस है, और दूसरा इस जीनस की एक विशिष्ट प्रजाति को परिभाषित करता है और इसे विशिष्ट विशेषण कहा जाता है। सामान्य नाम हमेशा बड़े अक्षर और विशिष्ट नाम के साथ लिखा जाता है उदाहरण के लिए, भले ही विशिष्ट विशेषण किसी वैज्ञानिक के सम्मान में दिया गया हो, छोटे अक्षर के साथ क्लोस्ट्रीडियम पेस्ट्यूरियनम. पाठ में, विशेष रूप से लैटिन ग्राफिक्स के साथ, सभी वाक्यांश इटैलिकाइज़ किए गए हैं। किसी सूक्ष्मजीव के नाम का बार-बार उल्लेख करते समय, सामान्य नाम को एक या अधिक प्रारंभिक अक्षरों में छोटा किया जा सकता है, उदाहरण के लिए साथ।पेस्ट्यूरियनम. यदि पाठ में दो सूक्ष्मजीवों के नाम हैं जो एक ही अक्षर से शुरू होते हैं (उदाहरण के लिए, क्लोस्ट्रीडियम पेस्ट्यूरियनमऔर सिट्रोबैक्टर फ्रायंडी), तो संक्षिप्ताक्षर भिन्न होने चाहिए (एस. पेस्ट्यूरियनमऔर सीटी. freundii). यदि किसी सूक्ष्मजीव की पहचान केवल जीनस से की जाती है, तो विशिष्ट विशेषण के बजाय sp शब्द लिखा जाता है। (प्रजातियाँ- प्रकार), उदाहरण के लिए स्यूडोमोनासएस.पी. इस मामले में, जब पाठ में किसी सूक्ष्मजीव के नाम का दोबारा उल्लेख किया जाता है, तो सामान्य नाम हमेशा पूरा लिखा जाना चाहिए।

किसी उप-प्रजाति को नाम देने के लिए, एक वाक्यांश का उपयोग करें जिसमें जीनस का नाम, साथ ही विशिष्ट और उप-विशिष्ट विशेषण शामिल हों। इन विशेषणों के बीच अंतर करने के लिए उनके बीच एक अक्षर संयोजन लिखा जाता है, जो एक संक्षिप्त शब्द उपप्रजाति है - "सबस्प।" या (कम सामान्यतः) "एसएस।" उदाहरण के लिए, लैक्टोबेसिलस delbrueckiiउप. बुल्गारिकस.

प्रत्येक स्ट्रेन के लिए, सूक्ष्मजीव संस्कृतियों के संग्रह के नाम का संक्षिप्त नाम भी इंगित करें जिसमें यह संग्रहीत है, और वह संख्या जिसके तहत इसे वहां सूचीबद्ध किया गया है। उदाहरण के लिए, क्लोस्ट्रीडियम ब्यूटिरिकमएटीसीसी 19398 का ​​मतलब है कि यह स्ट्रेन अमेरिकन टाइप कल्चर कलेक्शन (एटीसीसी) में 19398 नंबर के तहत रखा गया है। सूक्ष्मजीवों के विश्व-प्रसिद्ध संग्रहों की एक सूची, सूक्ष्मजीव संस्कृतियों के कैटलॉग में बर्गेस मैनुअल ऑफ सिस्टमैटिक बैक्टीरियोलॉजी, 1984-1989 में दी गई है। और अन्य संदर्भ प्रकाशन।

सूक्ष्मजीवों की किसी भी नई प्रजाति का विवरण एक प्रकार के तनाव पर आधारित होता है, जो सूक्ष्मजीवों के संग्रह में से एक में संग्रहीत होता है और इस प्रजाति के गुणों की समग्रता पर आधारित होता है।

मूल लेख या परिभाषा में वर्णित। प्रकार का तनाव प्रजाति का नामकरण प्रकार है क्योंकि प्रजाति का नाम इसे सौंपा गया है। यदि मूल रूप से उसी प्रजाति में शामिल कोई भी उपभेद बाद में विशेष प्रजाति के रूप में नामित होने के योग्य पाया जाता है, तो उन्हें नए नाम दिए जाने चाहिए, प्रकार और संबंधित उपभेदों के लिए पुरानी प्रजाति का नाम बरकरार रखा जाना चाहिए। इस मामले में, नामांकित स्ट्रेन की संख्या वही रहती है। प्रामाणिक उपभेद वे हैं जो अपने गुणों से पूरी तरह मेल खाते हैं।

एक जीनस के लिए, नामकरण प्रकार एक विशेष रूप से नामित प्रकार की प्रजाति है जिसमें लक्षणों का एक सेट होता है जो किसी दिए गए टैक्सोन के प्रतिनिधियों की सबसे विशेषता है। उदाहरण के लिए, प्रकार में रोग-कीटप्रकार की प्रजाति है में।subtilis.

कुछ गाइड और कैटलॉग नामित सूक्ष्मजीवों के पुराने नामों के साथ-साथ उन लेखकों के नाम भी दर्शाते हैं जिन्होंने पहली बार इस सूक्ष्मजीव को अलग किया था, और प्रकाशन का वर्ष जिसमें इस जीव का पहली बार वर्णन किया गया था। उदाहरण के लिए, खमीर के प्रकारों में से एक को सूक्ष्मजीवों के अखिल रूसी संग्रह (वीकेएम) की सूची में दर्शाया गया है Candida मैगनोलिया(लॉडर एट क्रेगर वैन रिज, 1952) मेयर एट यारो 1978, बीकेएम वाई-1685। इसका मतलब यह है कि इसका वर्णन पहली बार 1952 में एक प्रकाशन में लॉडर और क्रेगर वैन रिज द्वारा किया गया था, उस समय इस प्रजाति का नाम रखा गया था टोरुलोप्सिस मैगनोलिया. 1978 में टोरुलोप्सिस मैगनोलियामेयर और यारो जैसे शोधकर्ताओं द्वारा इसका नाम बदल दिया गया Candida मैगनोलियाऔर वर्तमान में वीकेएम में वीकेएम संख्या वाई-1685 के तहत संग्रहीत है। स्ट्रेन संख्या के सामने अक्षर Y का अर्थ "यीस्ट" है।

"तनाव" की अवधारणा के अलावा, "संस्करण", "प्रकार" और "रूप" शब्द का उपयोग सूक्ष्म जीव विज्ञान में किया जाता है। इनका उपयोग आमतौर पर सूक्ष्मजीवों के उपभेदों को नामित करने के लिए किया जाता है जो कि प्रकार के तनाव से कुछ विशेषताओं में भिन्न होते हैं। वह उपभेद जो रूपात्मक विशेषताओं में विशिष्ट उपभेद से भिन्न होता है, कहलाता है मोर्फोवर(मॉर्फोटाइप), शारीरिक और जैव रासायनिक विशेषताएं - बायोवर(जैवप्रकार, शारीरिक प्रकार), कुछ रासायनिक यौगिकों को संश्लेषित करने की क्षमता के अनुसार - hemovar(केमोफॉर्म, केमोटाइप), खेती की स्थिति - किस्म,बैक्टीरियोफेज की शुरूआत पर प्रतिक्रिया के प्रकार से - फागोवर(फैगोटाइप, लाइसोटाइप), एंटीजेनिक विशेषताएं – सेरोवर(सीरोटाइप)
और इसी तरह।

सूक्ष्मजीवों के आनुवंशिकी पर काम में इस शब्द का प्रयोग अक्सर किया जाता है "क्लोन",जिससे हमारा तात्पर्य एकल मूल कोशिका से अलैंगिक रूप से प्राप्त आनुवंशिक रूप से संबंधित कोशिकाओं की आबादी से है। आण्विक जीव विज्ञान में, एक क्लोन एकाधिक को संदर्भित करता है

समान डीएनए अनुक्रमों की प्रतियां क्लोनिंग वैक्टर (उदाहरण के लिए, प्लास्मिड) में डालकर प्राप्त की जाती हैं। शब्द "आनुवंशिक रूप से संशोधित" या "पुनः संयोजक" उपभेदों का तात्पर्य आनुवंशिक इंजीनियरिंग हेरफेर के परिणामस्वरूप प्राप्त सूक्ष्मजीवों के उपभेदों से है। अक्सर उत्परिवर्तनों का उपयोग करके सूक्ष्मजीवों के नए उपभेद प्राप्त किए जाते हैं।

प्राकृतिक या मानव निर्मित स्रोतों से पृथक सूक्ष्मजीवों के प्रत्येक नए तनाव को सूक्ष्मजीव के गुणों पर डेटा का एक पूरा सेट प्राप्त करने के लिए चित्रित किया जाना चाहिए।
शुद्ध संस्कृति में. इन डेटा का उपयोग, उदाहरण के लिए, औद्योगिक रूप से मूल्यवान उपभेदों के पासपोर्ट को संकलित करने के साथ-साथ उनकी पहचान के लिए भी किया जा सकता है।

पहचान का उद्देश्य - अध्ययन किए गए और स्वीकृत (आधिकारिक तौर पर पंजीकृत) प्रजातियों के साथ इसके गुणों की तुलना के आधार पर अध्ययन किए गए तनाव की वर्गीकरण स्थिति स्थापित करें। इसलिए, पहचान का परिणाम आम तौर पर कुछ प्रजातियों या असाइनमेंट के साथ अध्ययन के तहत सूक्ष्मजीव की पहचान होती है
एक निश्चित जाति के लिए. यदि अध्ययन किया गया स्ट्रेन या स्ट्रेन का समूह ज्ञात टैक्सा के प्रतिनिधियों से उनके गुणों में भिन्न है, तो उन्हें एक नए टैक्सोन में अलग किया जा सकता है। ऐसा करने के लिए, नए टैक्सोन का विवरण दिया गया है, उदाहरण के लिए, बैक्टीरिया के मामले में, निम्नलिखित: टैक्सोन में शामिल उपभेदों की एक सूची; प्रत्येक स्ट्रेन की विशेषताएं; आवश्यक मानी जाने वाली संपत्तियों की सूची
टैक्सन में; संपत्तियों की एक सूची जो निकटतम उच्च टैक्सोन में प्रतिनिधित्व के लिए एक टैक्सोन को अर्हता प्राप्त करती है; नैदानिक ​​विशेषताओं की एक सूची जो प्रस्तावित टैक्सन को निकट से संबंधित टैक्सा से अलग करती है; विशिष्ट (प्रजाति) तनाव का एक अलग विवरण; एक सूक्ष्मजीव की तस्वीर.

किसी नए प्रस्तावित टैक्सोन को आधिकारिक तौर पर स्वीकार किए जाने के लिए, उसका विवरण कुछ नियमों के अनुसार प्रकाशित किया जाना चाहिए। उदाहरण के लिए, बैक्टीरियल टैक्सोन के वैध या अधिकृत प्रकाशन के लिए इंटरनेशनल जर्नल ऑफ सिस्टमैटिक एंड इवोल्यूशनरी माइक्रोबायोलॉजी (आईजेएसईएम) में इसका वर्णन करने वाले एक लेख के प्रकाशन की आवश्यकता होती है। यदि प्रकाशन किसी अन्य प्रतिष्ठित वैज्ञानिक पत्रिका (प्रभावी प्रकाशन) में छपता है, तो उस पत्रिका के लेख का पुनर्मुद्रण IJSEM को भेजा जाता है। 1980 से, IJSEM ने नियमित रूप से बैक्टीरिया के कानूनी नामों की तथाकथित सूचियाँ प्रकाशित की हैं। वे उन सभी जीवाणु नामों को सूचीबद्ध करते हैं जो IJSEM (वास्तविक या अधिकृत प्रकाशन) में प्रकाशित हुए हैं या पहले किसी में प्रभावी रूप से प्रकाशित हुए हैं

अन्य प्रतिष्ठित पत्रिकाएँ। एक बार जब किसी जीवाणु का नाम अधिकृत नामों की IJSEM सूची में शामिल हो जाता है, तो नाम वैध माना जाता है, भले ही वह पहले IJSEM या किसी अन्य जर्नल में प्रकाशित हुआ हो। IJSEM में या IJSEM के वैध नामों की सूची में किसी दिए गए टैक्सोन के नाम के प्रकाशन की तारीख टैक्सोन के लिए प्राथमिकता है।

एक नए प्रकार के सूक्ष्मजीव के एक प्रकार के तनाव की संस्कृति को विश्व महत्व के सूक्ष्मजीवों के संग्रह में से एक में भंडारण के लिए स्थानांतरित किया जाता है। यदि एक प्रकार का स्ट्रेन खो जाता है, तो इसे तथाकथित नियोटाइप स्ट्रेन से बदला जा सकता है। इस मामले में, यह पुष्टि की जानी चाहिए कि नए स्ट्रेन के गुण खोए हुए स्ट्रेन के विवरण से अच्छी तरह मेल खाते हैं। यह इंगित करने के लिए कि किसी टैक्सोन को पहली बार प्रस्तावित किया जा रहा है, नए परिवार के नाम के बाद संक्षिप्त नाम "fam" जोड़ा जाता है। नोव.'', एक नया जीनस - ''जनरल. nov.'', और नई प्रजाति - ''sp. नवंबर।" उदाहरण के लिए,
2000 में, सह-लेखकों के साथ, बैक्टीरिया का एक नया परिवार प्रस्तावित किया गया था - ओस्सिलोक्लोरिडेसी, परिवार नवम्बर अभिव्यक्ति "प्रजाति इंसर्टैक सेडिस" का अर्थ है कि हम एक ऐसी प्रजाति के बारे में बात कर रहे हैं जिसकी अस्थायी रूप से कोई निश्चित वर्गीकरण स्थिति नहीं है, क्योंकि यह स्पष्ट नहीं है कि उच्च क्रम के किस वर्गीकरण में - जीनस या परिवार - दी गई प्रजाति को रखा जाना चाहिए इसके लिए आवश्यक प्रायोगिक डेटा की कमी
डेटा।

2 विवरण और पहचान

सूक्ष्मजीवों

जैसा कि पहले ही उल्लेख किया गया है, प्रोकैरियोट्स और यूकेरियोटिक सूक्ष्मजीवों के विभिन्न समूहों के वर्गीकरण और पहचान के सिद्धांतों में महत्वपूर्ण अंतर हैं। वर्गों, आदेशों के अनुसार मशरूम की पहचान
और परिवार, सबसे पहले, यौन संरचनाओं की विशिष्ट संरचनात्मक विशेषताओं और गठन के तरीकों पर आधारित है। इसके अलावा, अलैंगिक स्पोरुलेशन की विशेषताएं, मायसेलियम की संरचना और विकास की डिग्री (अल्पविकसित, अच्छी तरह से विकसित, सेप्टेट या नॉनसेप्टेट), सांस्कृतिक (कॉलोनी) और शारीरिक विशेषताओं का उपयोग किया जाता है। परिवारों के भीतर प्रजातियों का विभेदन और प्रजातियों की पहचान प्राप्त रूपात्मक लक्षणों का उपयोग करके की जाती है
इलेक्ट्रॉन माइक्रोस्कोपी, साथ ही शारीरिक और सांस्कृतिक विशेषताओं का उपयोग करना। सभी मशरूमों की पहचान के लिए कोई एक निर्धारक नहीं है, इसलिए पहले पहचाने जाने वाले मशरूम का वर्ग या क्रम निर्धारित किया जाता है और फिर इस वर्ग या क्रम के लिए उपयुक्त निर्धारक का उपयोग किया जाता है।

यीस्ट कवक की पहचान, जो विभिन्न सूक्ष्मजीवविज्ञानी अध्ययनों में व्यापक रूप से उपयोग की जाने वाली वस्तुओं में से एक है, सांस्कृतिक (मैक्रोमोर्फोलॉजिकल), साइटोलॉजिकल, शारीरिक और जैव रासायनिक विशेषताओं, जीवन चक्र की विशेषताओं और यौन प्रक्रिया, पारिस्थितिकी से संबंधित विशिष्ट विशेषताओं पर आधारित है और की जाती है। खमीर के लिए विशेष निर्धारकों का उपयोग करना।

शैवाल के सूक्ष्म रूपों का वर्गीकरण उनकी कोशिकाओं की संरचना और वर्णक की संरचना पर आधारित है। प्रोटोजोआ की व्यवस्थित स्थिति रूपात्मक विशेषताओं और जीवन चक्रों का उपयोग करके निर्धारित की जाती है। इस प्रकार, यूकेरियोट्स की पहचान मुख्य रूप से उनकी आकृति विज्ञान और विकास चक्र की विशेषताओं पर आधारित है।

प्रोकैरियोट्स की पहचान, जो यूकेरियोट्स की तुलना में रूपात्मक रूप से कम विविध हैं, फेनोटाइपिक और, कई मामलों में, जीनोटाइपिक लक्षणों की एक विस्तृत श्रृंखला के उपयोग पर आधारित है। यूकेरियोट्स की पहचान की तुलना में अधिक हद तक, यह कार्यात्मक विशेषताओं पर आधारित है, क्योंकि अधिकांश बैक्टीरिया की पहचान उनकी उपस्थिति से नहीं, बल्कि केवल यह पता लगाकर की जा सकती है कि वे किन प्रक्रियाओं को पूरा करने में सक्षम हैं।

बैक्टीरिया का वर्णन और पहचान करते समय, उनके सांस्कृतिक गुण, आकृति विज्ञान, कोशिका संगठन, शारीरिक और जैव रासायनिक विशेषताएं, कोशिकाओं की रासायनिक संरचना, सामग्री

डीएनए में गुआनिन और साइटोसिन (जीसी), जीन में न्यूक्लियोटाइड अनुक्रम 16 एस आरआरएनए और अन्य फेनो- और जीनोटाइपिक विशेषताओं के संश्लेषण को एन्कोडिंग करता है। इस मामले में, निम्नलिखित नियमों का पालन किया जाना चाहिए: शुद्ध संस्कृतियों के साथ काम करें, मानक अनुसंधान विधियों का उपयोग करें, और उन कोशिकाओं का भी उपयोग करें जो टीकाकरण के लिए सक्रिय शारीरिक अवस्था में हैं।

2.1 सांस्कृतिक गुण

सांस्कृतिक, या मैक्रोमोर्फोलॉजिकल, गुणों में ठोस और तरल पोषक मीडिया पर सूक्ष्मजीवों के विकास की विशिष्ट विशेषताएं शामिल हैं।

2.1.1 ठोस मीडिया पर विकास

सघन पोषक माध्यम की सतह पर, बीजारोपण के आधार पर, सूक्ष्मजीव कॉलोनी, स्ट्रीक या निरंतर लॉन के रूप में विकसित हो सकते हैं। कालोनीइसे एक ही प्रकार की कोशिकाओं का पृथक समूह कहा जाता है, जो अधिकांश मामलों में एक ही कोशिका से विकसित होता है। इस पर निर्भर करते हुए कि कोशिकाएँ कहाँ विकसित हुईं (घने पोषक माध्यम की सतह पर, उसकी मोटाई में या बर्तन के तल पर), उन्हें प्रतिष्ठित किया जाता है सतही, गहराऔर तलउपनिवेश.

शिक्षा शीर्ष परएनएएलघने सब्सट्रेट पर कई सूक्ष्मजीवों के विकास की सबसे महत्वपूर्ण विशेषता कालोनियां हैं। ऐसी कॉलोनियाँ बहुत विविध हैं। उनका वर्णन करते समय निम्नलिखित विशेषताओं को ध्यान में रखा जाता है:

प्रोफ़ाइल- सपाट, उत्तल, गड्ढा-आकार, शंकु-आकार, आदि (चित्र 1);

रूप- गोल, अमीबॉइड, अनियमित, प्रकंद, आदि (चित्र 2);

आकार (व्यास)- मिलीमीटर में मापा गया; यदि कॉलोनी का आकार 1 मिमी से अधिक नहीं है, तो उन्हें बिंदीदार कहा जाता है;

सतह- चिकना, खुरदरा, अंडाकार, मुड़ा हुआ, झुर्रीदार, संकेंद्रित वृत्तों वाला या रेडियल धारीदार;

चमकऔर पारदर्शिता- कॉलोनी चमकदार, मैट, सुस्त, ख़स्ता, पारदर्शी है;

रंग- रंगहीन (गंदी सफेद कालोनियों को रंगहीन के रूप में वर्गीकृत किया जाता है) या रंजित - सफेद, पीला, सुनहरा, नारंगी
वाया, बकाइन, लाल, काला, आदि; में आवंटन पर विशेष रूप से ध्यान दें

वर्णक सब्सट्रेट; एक्टिनोमाइसेट्स की कॉलोनियों का वर्णन करते समय, एरियल और सब्सट्रेट मायसेलियम के रंजकता को नोट किया जाता है, साथ ही माध्यम में पिगमेंट की रिहाई भी नोट की जाती है;

किनारा- चिकना, लहरदार, दांतेदार, झालरदार, आदि (चित्र 3);

संरचना- सजातीय, महीन या मोटे दाने वाला, प्रवाही, आदि (चित्र 4); कॉलोनी के किनारे और संरचना को एक आवर्धक कांच का उपयोग करके या माइक्रोस्कोप के कम आवर्धन पर निर्धारित किया जाता है। ऐसा करने के लिए, पेट्री डिश को ढक्कन नीचे करके माइक्रोस्कोप स्टेज पर रखा जाता है;

स्थिरताकॉलोनी की सतह को एक लूप से छूकर निर्धारित किया जाता है। कॉलोनी को एगर से आसानी से हटाया जा सकता है, घना, मुलायम या एगर में बढ़ता हुआ, श्लेष्मा (लूप से चिपक जाता है), चिपचिपा, एक फिल्म की तरह दिखता है (पूरी तरह से हटा दिया जाता है), नाजुक होता है (लूप द्वारा छूने पर आसानी से टूट जाता है) .

1 - घुमावदार; 2 - गड्ढे के आकार का; 3 - ढेलेदार;

4 - सब्सट्रेट में बढ़ रहा है; 5 - समतल; 6 – उत्तल;

7 - अश्रु के आकार का; 8 -शंकु के आकार का

चित्र 1 - कॉलोनी प्रोफ़ाइल

गहरी कॉलोनियाँ,इसके विपरीत, वे काफी नीरस हैं। अक्सर वे कमोबेश चपटी दाल की तरह दिखते हैं,
प्रक्षेपण में वे नुकीले सिरे वाले अंडाकार आकार के होते हैं। केवल
कुछ जीवाणुओं में, गहरी कॉलोनियाँ रूई के गुच्छों के समान होती हैं
पोषक माध्यम में फिलामेंटस वृद्धि के साथ। यदि सूक्ष्मजीव कार्बन डाइऑक्साइड या अन्य गैसें छोड़ते हैं तो गहरी कॉलोनियों का निर्माण अक्सर घने माध्यम के टूटने के साथ होता है।

निचली कॉलोनियाँविभिन्न सूक्ष्मजीव आमतौर पर नीचे की ओर फैली हुई पतली पारदर्शी फिल्मों का रूप ले लेते हैं।

कॉलोनी का आकार और कई अन्य विशेषताएं उम्र के साथ बदल सकती हैं और पर्यावरण की संरचना पर निर्भर करती हैं। इसलिए, उनका वर्णन करते समय, संस्कृति की आयु, माध्यम की संरचना और खेती के तापमान का संकेत दें।

1 - गोल; 2 - स्कैलप्ड किनारे के साथ गोल; 3 – किनारे के चारों ओर एक रोल के साथ गोल; 4, 5 – प्रकंद; 6 - एक प्रकंद किनारे के साथ; 7 - अमीबॉइड;
8 - धागे जैसा; 9 - मुड़ा हुआ; 10 - गलत;

11 - गाढ़ा; 12 - जटिल

चित्र 2 - कॉलोनी का आकार

/ - चिकना; 2 - लहरदार; 3 - दांतेदार; 4 - ब्लेड वाला; 5 - गलत; 6 - रोमक; 7 - फिलामेंटस; 8 – विलायती; 9 - शाखायुक्त

चित्र 3 - कॉलोनी का किनारा

1 – सजातीय; 2 - बारीक दाने वाला; 3 - मोटे दाने वाला;

4 - प्रवाहमय; 5 – रेशेदार

चित्र 4 - कॉलोनी संरचना

सूक्ष्मजीवों की वृद्धि का वर्णन करते समय स्ट्रोक सेनिम्नलिखित विशेषताओं पर ध्यान दें: अल्प, मध्यम या प्रचुर, निरंतर
चिकने या लहरदार किनारे के साथ, स्पष्ट आकार का, अलग-अलग कॉलोनियों की श्रृंखलाओं जैसा, फैला हुआ, पिननेट, पेड़ जैसा, या प्रकंद (चित्र 5)। प्लाक के ऑप्टिकल गुणों, उसके रंग, सतह और स्थिरता का वर्णन करें।

कालोनियों और स्ट्रीक वृद्धि का वर्णन करने के लिए, कई सूक्ष्मजीव अक्सर मांस पेप्टोन एगर पर उगाए जाते हैं। मीट-पेप्टोन जिलेटिन का भी उपयोग किया जाता है। गहरी कालोनियों को बेहतर ढंग से देखने के लिए, अगर या जिलेटिन युक्त मीडिया को स्पष्ट करने की सिफारिश की जाती है।

1 - चिकने किनारे के साथ ठोस; 2 - लहरदार किनारे के साथ ठोस; 3 - साफ़ तौर पर दिखाई देना; 4 – फैलाना; 5 - पंखदार; 6 - प्रकंद

चित्र 5 - रेखा के साथ बैक्टीरिया की वृद्धि

2.1.2. तरल मीडिया में वृद्धि

तरल पोषक माध्यम में सूक्ष्मजीवों की वृद्धि अधिक समान होती है और माध्यम की गंदगी, फिल्म या तलछट के निर्माण के साथ होती है। तरल माध्यम में सूक्ष्मजीवों की वृद्धि को चिह्नित करते हुए, यह नोट किया गया है मैलापन की डिग्री(कमजोर, मध्यम या मजबूत), फिल्म की विशेषताएं(पतला, घना या ढीला, चिकना या मुड़ा हुआ),
और जब तलछट बनती है, तो यह संकेत दिया जाता है कि यह कम है या प्रचुर, घना है, ढीला है, चिपचिपा है या परतदार है।

अक्सर सूक्ष्मजीवों की वृद्धि के साथ गंध, पर्यावरण में रंजकता और गैस का निकलना भी शामिल होता है। उत्तरार्द्ध का पता फोम, बुलबुले के गठन और "फ्लोट्स" की मदद से भी लगाया जाता है - एक छोर पर सील की गई छोटी ट्यूब। फ्लोट लगा दिया गया है
माध्यम को स्टरलाइज़ करने से पहले सीलबंद सिरे के साथ टेस्ट ट्यूब में डालें और सुनिश्चित करें कि यह माध्यम से पूरी तरह भरा हुआ है। यदि गैस छोड़ी जाती है तो यह बुलबुले के रूप में फ्लोट में जमा हो जाती है।

तरल मीडिया में सूक्ष्मजीवों के विकास पैटर्न का वर्णन करने के लिए, उन्हें मांस पेप्टोन शोरबा (एमपीबी) या किसी अन्य माध्यम में उगाया जाता है जो अच्छी वृद्धि सुनिश्चित करता है।

2.2 रूपात्मक विशेषताएँ

जीवाणु कोशिकाओं की रूपात्मक विशेषताओं और संगठन में कोशिकाओं का आकार और आकार, उनकी गतिशीलता, कशाभिका की उपस्थिति और कशाभिका के प्रकार, और बीजाणु बनाने की क्षमता जैसी विशेषताएं शामिल हैं। कोशिकाओं में जांच भी उपयोगी हो सकती है।
बैक्टीरिया के अलग-अलग समूहों में निहित विशिष्ट झिल्ली प्रणालियाँ (क्लोरोसोम, कार्बोक्सीसोम, फ़ाइकोबिलिसोम, गैस रिक्तिकाएँ, आदि)
रियम, साथ ही समावेशन (पैरास्पोरल बॉडीज, वॉलुटिन ग्रैन्यूल,
पॉली-बीटा-हाइड्रॉक्सीब्यूटाइरेट, पॉलीसेकेराइड, आदि)। बैक्टीरिया के वर्गीकरण के लिए कोशिकाओं का ग्राम स्टेनिंग प्राथमिक महत्व का है।
और उनकी कोशिका भित्ति की संरचना।

2.3 शारीरिक और जैव रासायनिक गुण

शारीरिक और जैव रासायनिक गुणों के अध्ययन में, सबसे पहले, अध्ययन किए गए जीवाणु के पोषण की विधि (फोटो/कीमो-, ऑटो/हेटरोट्रॉफी) और ऊर्जा चयापचय के प्रकार (किण्वन, एरोबिक या एनारोबिक श्वसन या प्रकाश संश्लेषण की क्षमता) की स्थापना शामिल है। . बैक्टीरिया और आणविक ऑक्सीजन का अनुपात, तापमान, पर्यावरण का पीएच, लवणता, प्रकाश और अन्य पर्यावरणीय कारकों जैसी विशेषताओं को निर्धारित करना महत्वपूर्ण है। संकेतों के इस समूह में

इसमें कार्बन, नाइट्रोजन और सल्फर के स्रोतों के रूप में उपयोग किए जाने वाले सब्सट्रेट्स की सूची, विटामिन और अन्य विकास कारकों की आवश्यकता, विशिष्ट चयापचय उत्पादों का निर्माण और कुछ एंजाइमों की उपस्थिति भी शामिल है। इस प्रयोजन के लिए, विशेष परीक्षणों का उपयोग किया जाता है।

इन संकेतों का पता लगाने के लिए उपयोग किए जाने वाले कई परीक्षण (कभी-कभी नियमित परीक्षण भी कहा जाता है) निदान के लिए महत्वपूर्ण हैं और चिकित्सा सूक्ष्म जीव विज्ञान में व्यापक रूप से उपयोग किए जाते हैं। उनके उत्पादन के लिए समय के महत्वपूर्ण निवेश, बड़ी संख्या में जटिल मीडिया और अभिकर्मकों, मानक शर्तों के अनुपालन और सावधानीपूर्वक निष्पादन की आवश्यकता होती है। मुख्य रूप से चिकित्सा महत्व के कुछ सूक्ष्मजीवों की पहचान करने की प्रक्रिया को तेज करने और सुविधाजनक बनाने के लिए, विभिन्न परीक्षण प्रणालियाँ विकसित की गई हैं, उदाहरण के लिए, हॉफमैन-ला रोशे (स्विट्जरलैंड) से ऑक्सी/फर्म ट्यूब, माइकोट्यूब और एंटरोट्यूब II सिस्टम आदि। इस प्रकार, एंटरोट्यूब II प्रणाली, जिसे एंटरोबैक्टीरिया की पहचान के लिए डिज़ाइन किया गया है, यह एक प्लास्टिक कक्ष है जिसमें 12 कोशिकाएं होती हैं जिनमें रंगीन डायग्नोस्टिक मीडिया होता है। बीज सामग्री के साथ सुई के कक्ष के माध्यम से सभी मीडिया का टीकाकरण ट्रांसलेशनल-रोटेशनल आंदोलनों द्वारा किया जाता है। ऊष्मायन 37 ºС के तापमान पर 24 घंटे के लिए किया जाता है। एक सकारात्मक या नकारात्मक परीक्षण परिणाम माध्यम के रंग में परिवर्तन, अगर के टूटने (गैस निर्माण परीक्षण) या विशेष अभिकर्मकों (इंडोल गठन परीक्षण, वोजेस-प्रोस्काउर प्रतिक्रिया) की शुरूआत के बाद आंका जाता है। प्रत्येक विशेषता को एक विशिष्ट संख्या द्वारा निर्दिष्ट किया जाता है, इसलिए प्राप्त डेटा को उपयुक्त प्रोग्राम के साथ कंप्यूटर में दर्ज किया जा सकता है और अध्ययन के तहत तनाव की वर्गीकरण स्थिति के बारे में उत्तर प्राप्त किया जा सकता है।

जीवाणु कोशिकाओं की संरचना का निर्धारण उनकी व्यवस्थितता (केमोसिस्टमैटिक्स) के लिए भी महत्वपूर्ण है। केमोटैक्सोनोमिक विधियां विशेष रूप से बैक्टीरिया के उन समूहों के लिए महत्वपूर्ण हो सकती हैं जिनमें रूपात्मक और शारीरिक विशेषताएं व्यापक रूप से भिन्न होती हैं और संतोषजनक पहचान के लिए अपर्याप्त होती हैं। विभिन्न प्रोकैरियोट्स की कोशिका दीवारों में अद्वितीय हेटरोपोलिमर के कई वर्ग शामिल हैं: म्यूरिन (या स्यूडोम्यूरिन), लिपोपॉलीसेकेराइड, माइकोलिक और टेकोइक एसिड। कोशिका भित्ति की संरचना बैक्टीरिया के सीरोलॉजिकल गुणों को भी निर्धारित करती है। यह उनकी पहचान के लिए इम्यूनोकेमिकल तरीकों को रेखांकित करता है।

जीवाणु कोशिकाओं की लिपिड और फैटी एसिड संरचना का उपयोग कभी-कभी केमोटैक्सोनोमिक मार्कर के रूप में भी किया जाता है। गैस क्रोमैटोग्राफ़िक विश्लेषण के विकास से फैटी एसिड का गहन अध्ययन संभव हो गया। लिपिड संरचना में अंतर का उपयोग जीनस और यहां तक ​​कि प्रजाति स्तर पर बैक्टीरिया की पहचान करने के लिए किया जाता है। हालाँकि, इस विधि की कुछ सीमाएँ हैं, क्योंकि कोशिकाओं की फैटी एसिड सामग्री संस्कृति की स्थितियों और संस्कृति की उम्र पर निर्भर हो सकती है।

कुछ जीवाणुओं का वर्गीकरण क्विनोन की संरचना को ध्यान में रखता है
और अन्य इलेक्ट्रॉन वाहक, साथ ही रंगद्रव्य।

जीन अनुवाद के उत्पादों - सेलुलर प्रोटीन का अध्ययन करके बैक्टीरिया के पारस्परिक संबंध के बारे में महत्वपूर्ण जानकारी प्राप्त की जा सकती है। झिल्ली, राइबोसोमल, कुल सेलुलर प्रोटीन, साथ ही व्यक्तिगत एंजाइमों के अध्ययन के आधार पर, एक नई दिशा का गठन किया गया - प्रोटीन वर्गीकरण। राइबोसोमल प्रोटीन का स्पेक्ट्रा सबसे अधिक स्थिर होता है और इसका उपयोग परिवार या ऑर्डर स्तर पर बैक्टीरिया की पहचान करने के लिए किया जाता है। झिल्ली प्रोटीन का स्पेक्ट्रा जीनस, प्रजाति और यहां तक ​​कि अंतःविशिष्ट अंतर को प्रतिबिंबित कर सकता है। हालाँकि, किसी कोशिका के रासायनिक यौगिकों की विशेषताओं का उपयोग फेनोटाइप का वर्णन करने वाले अन्य डेटा से अलग करके बैक्टीरिया की पहचान करने के लिए नहीं किया जा सकता है, क्योंकि फेनोटाइपिक विशेषताओं के महत्व का आकलन करने के लिए कोई मानदंड नहीं है।

कभी-कभी बैक्टीरिया या खमीर जैसे अन्य सूक्ष्मजीवों की पहचान करने के लिए एक विधि का उपयोग किया जाता है। संख्यात्मक (या एडानसोनियन) वर्गीकरण. यह फ्रांसीसी वनस्पतिशास्त्री एम. एडनसन के विचारों पर आधारित है, जिन्होंने प्रस्तावित किया था कि जिन विभिन्न फेनोटाइपिक लक्षणों को ध्यान में रखा जा सकता है, उन्हें समकक्ष माना जाना चाहिए, जिससे जीवों के बीच वर्गीकरण संबंधी दूरियों को अनुपात के रूप में मापना संभव हो जाता है। अध्ययन किए गए लोगों की कुल संख्या में सकारात्मक लक्षणों की संख्या। अध्ययन के तहत दो जीवों के बीच समानता को फेनोटाइपिक विशेषताओं की सबसे बड़ी संभावित संख्या (आमतौर पर कम से कम एक सौ) का मात्रात्मक आकलन करके निर्धारित किया जाता है, जिन्हें चुना जाता है ताकि उनके विकल्प वैकल्पिक हों और "माइनस" और "प्लस" संकेतों द्वारा इंगित किया जा सके। समानता की डिग्री मिलान सुविधाओं की संख्या के आधार पर स्थापित की जाती है और इसे पत्राचार गुणांक के रूप में व्यक्त किया जाता है एस:


कहाँ + डी- उन विशेषताओं का योग जिनके लिए उपभेद ए और बी मेल खाते हैं;

- सकारात्मक विशेषताओं वाले दोनों उपभेद;

डी– दोनों नकारात्मक के साथ;

बी- उन विशेषताओं का योग जिनके लिए स्ट्रेन ए सकारात्मक है, स्ट्रेन बी नकारात्मक है;

साथ- उन विशेषताओं का योग जिसके लिए स्ट्रेन ए नकारात्मक है और स्ट्रेन बी सकारात्मक है।

पत्राचार गुणांक का मान 0 से 1 तक भिन्न हो सकता है। गुणांक 1 का अर्थ है पूर्ण पहचान, 0 का अर्थ है पूर्ण असमानता। विशेषताओं के संयोजन का मूल्यांकन कंप्यूटर का उपयोग करके किया जाता है। प्राप्त परिणाम एक समानता मैट्रिक्स के रूप में और/या डेंड्रोग्राम के रूप में प्रस्तुत किए जाते हैं। केवल निम्न रैंक (जीनस, प्रजाति) के सूक्ष्मजीवों के टैक्सा के बीच समानता का आकलन करते समय संख्यात्मक वर्गीकरण का उपयोग किया जा सकता है। यह किसी को सूक्ष्मजीवों के आनुवंशिक संबंध के बारे में सीधे निष्कर्ष निकालने की अनुमति नहीं देता है, लेकिन कुछ हद तक उनके फ़ाइलोजेनेटिक गुणों को दर्शाता है। इस प्रकार, यह स्थापित किया गया है कि बैक्टीरिया की फेनोटाइपिक विशेषताएं जिनका वर्तमान में अध्ययन किया जा सकता है, उनके जीनोटाइप के गुणों के 5 से 20% तक प्रतिबिंबित होती हैं।

2.4 जीनोटाइप अध्ययन

आणविक जीव विज्ञान के सफल विकास के परिणामस्वरूप सूक्ष्मजीवों के जीनोटाइप का अध्ययन संभव हो गया और जीनोसिस्टमैटिक्स का उदय हुआ। न्यूक्लिक एसिड विश्लेषण पर आधारित जीनोटाइप अनुसंधान, सिद्धांत रूप में, समय के साथ सूक्ष्मजीवों की एक प्राकृतिक (फ़ाइलोजेनेटिक) प्रणाली का निर्माण करना संभव बनाता है। बैक्टीरिया के फ़ाइलोजेनेटिक संबंधों का मूल्यांकन किया जाता है दाढ़ सामग्री का निर्धारण गुआनिन और साइटोसिन (जीसी) डीएनए में, डीएनए विधियाँडीएनए और डीएनएडीएनए जांच का उपयोग करके आरआरएनए संकरण, साथ ही 5 में न्यूक्लियोटाइड अनुक्रम का अध्ययनएस, जे6 एसऔर
23
एस आरआरएनए.

2.4.1 जीसी की मोलर सामग्री का निर्धारण

जैसा कि पहले ही संकेत दिया गया है, प्रोकैरियोट्स में डीएनए आधारों की कुल संख्या से जीसी की दाढ़ सामग्री का निर्धारण 25 से 75% तक होता है। प्रत्येक जीवाणु प्रजाति में एक विशिष्ट औसत जीसी सामग्री वाला डीएनए होता है। हालाँकि, चूंकि आनुवंशिक कोड विकृत है, और आनुवंशिक कोडिंग न केवल कोडिंग इकाइयों (ट्रिपलेट्स) में न्यूक्लियोटाइड आधारों की सामग्री पर आधारित है, बल्कि सापेक्ष स्थिति पर भी आधारित है, दो जीवाणु प्रजातियों के डीएनए में जीसी की समान औसत सामग्री हो सकती है उनके महत्वपूर्ण जीनोटाइपिक के साथ होना चाहिए

विभाजन। यदि दो जीव न्यूक्लियोटाइड संरचना में बहुत समान हैं, तो यह उनके विकासवादी संबंध का प्रमाण तभी हो सकता है, जब उनमें बड़ी संख्या में सामान्य फेनोटाइपिक विशेषताएं या अन्य तरीकों से पुष्टि की गई आनुवंशिक समानता हो। साथ ही, सामान्य फेनोटाइपिक गुणों वाले बैक्टीरिया के दो उपभेदों के डीएनए की न्यूक्लियोटाइड संरचना में विसंगति (10...15% से अधिक) से पता चलता है कि वे कम से कम विभिन्न प्रजातियों से संबंधित हैं।

2.4.2 डीएनए विधि डीएनए संकरण

बैक्टीरिया की आनुवंशिकता का आकलन करने के लिए यह विधि अधिक महत्वपूर्ण है। जब प्रयोग सावधानी से किए जाते हैं, तो उनकी आनुवंशिक समरूपता की डिग्री के बारे में बहुमूल्य जानकारी प्राप्त की जा सकती है। एक जीवाणु प्रजाति के भीतर, उपभेदों की आनुवंशिक समरूपता की डिग्री 70 से 100% तक पहुँच जाती है। हालाँकि, यदि, विकासवादी विचलन के परिणामस्वरूप, दो जीवाणुओं के जीनोम के न्यूक्लियोटाइड आधार अनुक्रम काफी हद तक भिन्न होते हैं, तो विशिष्ट डीएनए-डीएनए पुनर्संयोजन इतना कमजोर हो जाता है कि इसे मापा नहीं जा सकता है। इस मामले में, डीएनए-आरआरएनए संकरण जीवों की सीमा को महत्वपूर्ण रूप से बढ़ाना संभव बनाता है जिसमें आनुवंशिक समरूपता की डिग्री इस तथ्य के कारण निर्धारित की जा सकती है कि जीवाणु जीनोम एन्कोडिंग राइबोसोमल आरएनए के अपेक्षाकृत छोटे खंड में, मूल आधार अनुक्रम गुणसूत्र के अन्य भागों की तुलना में कहीं अधिक पूर्ण रूप से संरक्षित होता है। परिणामस्वरूप, डीएनए-आरआरएनए संकरण अक्सर बैक्टीरिया के जीनोम की काफी उच्च समरूपता को प्रकट करता है जिसमें डीएनए-डीएनए पुनर्संयोजन ध्यान देने योग्य समरूपता को प्रकट नहीं करता है।

2.4.3 डीएनए जांच (जीन जांच) विधि

डीएनए जांच विधि डीएनए-डीएनए आणविक संकरण विधि का एक रूप है। इस मामले में, संकरण प्रतिक्रिया दो कुल डीएनए तैयारियों के बीच नहीं, बल्कि डीएनए न्यूक्लियोटाइड अनुक्रम (जांच) के एक टुकड़े के बीच की जाती है, जिसमें एक विशिष्ट कार्य के लिए जिम्मेदार जीन (आनुवंशिक मार्कर) भी शामिल है (उदाहरण के लिए, कुछ एंटीबायोटिक का प्रतिरोध) ), और डीएनए का अध्ययन किया जा रहा बैक्टीरिया। जीन जांच बनाने का सबसे आम तरीका आणविक क्लोनिंग द्वारा विशिष्ट टुकड़ों को अलग करना है। ऐसा करने के लिए, पहले अध्ययन किए गए जीवाणु के डीएनए को एंडोन्यूक्लिअस के साथ विभाजित करके उसका एक जीन बैंक बनाएं।

प्रतिबंध, और फिर वैद्युतकणसंचलन द्वारा डीएनए टुकड़ों के योग से वांछित क्लोन का चयन करें, इसके बाद परिवर्तन द्वारा इन टुकड़ों के आनुवंशिक गुणों की जांच करें। इसके बाद, चयनित डीएनए टुकड़े को एक उपयुक्त प्लास्मिड (वेक्टर) में जोड़ा जाता है,
और इस संयुक्त प्लास्मिड को काम के लिए सुविधाजनक जीवाणु तनाव में पेश किया जाता है (उदाहरण के लिए, Escherichia कोलाई). प्लास्मिड डीएनए को डीएनए जांच करने वाले जीवाणु बायोमास से अलग किया जाता है और लेबल किया जाता है, उदाहरण के लिए, रेडियोआइसोटोप लेबल के साथ। फिर डीएनए जांच को संकरणित किया जाता है
जीवाणु डीएनए के साथ. परिणामी संकर क्षेत्रों को ऑटोरैडियोग्राफी द्वारा प्रदर्शित किया जाता है। वे किसी विशेष जीवाणु के गुणसूत्र के साथ आनुवंशिक मार्कर के संकरण की सापेक्ष आवृत्ति के आधार पर बनाते हैं
अध्ययनाधीन तनाव के साथ इन जीवाणुओं के आनुवंशिक संबंध के बारे में निष्कर्ष।

2.4.4 न्यूक्लियोटाइड अनुक्रम विश्लेषण विधि

राइबोसोमल आरएनए में

बैक्टीरिया की पहचान करने और उनके वर्गीकरण के लिए एक फ़ाइलोजेनेटिक प्रणाली बनाने के लिए, सबसे व्यापक और महत्वपूर्ण तरीका राइबोसोमल आरएनए में न्यूक्लियोटाइड अनुक्रमों का विश्लेषण है। 5S, 16S और 23S rRNA अणुओं में उच्चतम स्तर की आनुवंशिक स्थिरता वाले क्षेत्र होते हैं। ऐसा माना जाता है कि वे प्राकृतिक चयन के तंत्र से बाहर हैं और निरंतर दर पर होने वाले सहज उत्परिवर्तन के परिणामस्वरूप ही विकसित होते हैं। उत्परिवर्तनों का संचय केवल समय पर निर्भर करता है, इसलिए इन अणुओं के न्यूक्लियोटाइड अनुक्रम की जानकारी को उप-प्रजाति से साम्राज्य के स्तर पर जीवों के फ़ाइलोजेनेटिक संबंध को निर्धारित करने के लिए सबसे अधिक उद्देश्य माना जाता है। विश्लेषण के मामले में
5S rRNA आमतौर पर न्यूक्लियोटाइड का पूरा अनुक्रम निर्धारित करता है, प्रोकैरियोट्स में इस अणु में 120 न्यूक्लियोटाइड होते हैं। क्रमशः 1500 और 2500 न्यूक्लियोटाइड युक्त 16एस और 23एस आरआरएनए का अध्ययन करते समय, इन अणुओं से प्राप्त ऑलिगोन्यूक्लियोटाइड्स का अक्सर विशिष्ट प्रतिबंध एंडोन्यूक्लिअस का उपयोग करके विश्लेषण किया जाता है। सबसे व्यापक अध्ययन 16S rRNA में न्यूक्लियोटाइड अनुक्रम का अध्ययन है। विभिन्न सूक्ष्मजीवों के प्रतिनिधियों के 16S rRNA की संरचना के अध्ययन से प्रोकैरियोट्स के बीच आर्किया के एक समूह की पहचान हुई। समानता गुणांक मान सब, बैक्टीरिया और आर्किया के I6S rRNA को अलग करना 0.1 के भीतर है, जबकि मूल्य सब, 1.0 के बराबर न्यूक्लियोटाइड अनुक्रमों की पूर्ण समरूपता से मेल खाता है, और 0.02 यादृच्छिक संयोग के स्तर से मेल खाता है।

तेजी से, बैक्टीरिया की पहचान के लिए डेंड्रोग्राम प्रस्तावित किए जा रहे हैं, जो आरआरएनए में न्यूक्लियोटाइड्स (या ऑलिगोन्यूक्लियोटाइड्स) के अनुक्रम के अध्ययन के साथ-साथ डीएनए-डीएनए के अध्ययन के आधार पर बैक्टीरिया जेनेरा, प्रजातियों या उपभेदों के बीच संबंधों को दिखाते हैं।
और डीएनए-आरआरएनए संकरण। हालाँकि, उनकी फेनोटाइपिक विशेषताओं का अध्ययन किए बिना केवल आनुवंशिक तरीकों के आधार पर जन्म से पहले बैक्टीरिया की पहचान करना अक्सर पूरी तरह से असंभव होता है। इसलिए, जीवाणु वर्गीकरण पर काम करने का सबसे अच्छा तरीका जीनोटाइपिक और फेनोटाइपिक दोनों गुणों का अध्ययन माना जाता है। फ़ाइलोजेनेटिक और फेनोटाइपिक डेटा के बीच असंगतता के मामले में, अस्थायी रूप से बाद वाले को प्राथमिकता दी जाती है।

एक विशेष चुनौती उन बैक्टीरिया और आर्किया, विशेष रूप से समुद्री प्रजातियों की पहचान करना है, जो ज्ञात प्रयोगशाला पोषक मीडिया पर विकसित होने में असमर्थ हैं और जिनके लिए शुद्ध संस्कृतियां प्राप्त नहीं की जा सकती हैं। कुछ समय पहले तक यह समस्या अघुलनशील लगती थी। हालाँकि, लगभग 15 साल पहले, ऐसी विधियाँ विकसित की गईं जिससे निष्कर्षण, क्लोन करना, अनुक्रम करना संभव हो गया
और पर्यावरण से सीधे राइबोसोमल आरएनए की तुलना करें। इससे किसी दिए गए बायोटोप में रहने वाले सूक्ष्मजीवों को शुद्ध संस्कृति में अलग किए बिना सटीक रूप से गिनती और पहचान करना संभव हो गया। इस प्रकार पहचाने गए एक सूक्ष्मजीव जो प्रयोगशाला में "अप्रयुक्त" है, उसका वर्णन भी किया जा सकता है, लेकिन "कैंडिडेटस" (उम्मीदवार) शब्द जोड़कर। शब्द "कैंडिडेटस" नई प्रजाति के साथ तब तक जुड़ा रहेगा जब तक कि वैज्ञानिकों को प्रयोगशाला में इस जीव को विकसित करने और इसकी शुद्ध संस्कृति प्राप्त करने की स्थिति नहीं मिल जाती, जो इसके सभी गुणों का अध्ययन करने और कानूनी रूप से प्रकाशित करने की अनुमति देगा।

बैक्टीरिया की पहचान आमतौर पर बर्गीज़ मैनुअल ऑफ़ डिटरमिनेटिव बैक्टीरियोलॉजी का उपयोग करके की जाती है। इस मैनुअल का पहला संस्करण 1923 में प्रसिद्ध अमेरिकी बैक्टीरियोलॉजिस्ट डी. एच. बर्गई (1860-1937) के नेतृत्व में प्रकाशित हुआ था। तब से, इसे नियमित रूप से पुनः प्रकाशित किया जाता रहा है दुनिया के अग्रणी सूक्ष्म जीवविज्ञानियों की भागीदारी के साथ। नवीनतम, नौवें संस्करण में, सभी बैक्टीरिया को आसानी से पहचाने जाने योग्य फेनोटाइपिक विशेषताओं के अनुसार 35 समूहों में विभाजित किया गया है। इन विशेषताओं को रेखांकित किया गया है
समूह के नामों में. समूहों के भीतर बैक्टीरिया की वर्गीकरण स्थिति छोटी संख्या में फेनोटाइपिक लक्षणों के आधार पर संकलित तालिकाओं और कुंजियों का उपयोग करके निर्धारित की जाती है। कुछ जेनेरा के बैक्टीरिया की प्रजातियों को अलग करने के लिए विभेदीकरण सारणी, उदाहरण के लिए जीनस रोग-कीट, नहीं दिए गए हैं, और पाठक को बर्गीज़ गाइड टू द टैक्सोनॉमी ऑफ़ बैक्टीरिया का संदर्भ दिया गया है।

चार खंडों वाले बर्गीज़ मैनुअल ऑफ़ सिस्टमैटिक बैक्टीरियोलॉजी, 1984-1989 में बैक्टीरिया की वर्गीकरण स्थिति के बारे में अधिक संपूर्ण जानकारी है। बैक्टीरिया के प्रत्येक समूह के लिए, इसमें शामिल जेनेरा का विवरण दिया गया है
और प्रजातियाँ, जिनमें अस्पष्ट वर्गीकरण स्थिति वाली प्रजातियाँ भी शामिल हैं। एक विस्तृत फेनोटाइपिक विवरण के अलावा, जिसमें कोशिकाओं की आकृति विज्ञान, संगठन और रासायनिक संरचना, एंटीजेनिक गुण, कॉलोनियों के प्रकार, जीवन चक्र और पारिस्थितिकी की विशेषताएं शामिल हैं, जेनेरा की विशेषताएं डीएनए में जीसी की सामग्री के बारे में भी जानकारी प्रदान करती हैं। डीएनए-डीएनए और डीएनए-आरआरएनए संकरण के परिणाम। कुंजियाँ और तालिकाएँ आपको न केवल जीनस, बल्कि प्रजातियों के आधार पर भी बैक्टीरिया की पहचान करने की अनुमति देती हैं।

वर्तमान में, चार-खंड बर्गसी के मैनुअल ऑफ सिस्टमैटिक बैक्टीरियोलॉजी का दूसरा संस्करण प्रकाशित किया गया है। पहला खंड 2002 में प्रकाशित हुआ था। इसके अलावा, कई लेख और किताबें हैं जो बैक्टीरिया के व्यक्तिगत समूहों की पहचान करने के लिए मूल कुंजी प्रदान करती हैं। उदाहरण के लिए, बेसिली, स्यूडोमोनैड्स, एक्टिनोमाइसेट्स, एंटरोबैक्टीरिया।

वर्तमान में, बहुत सारे नए डेटा जमा हो गए हैं, जिनमें राइबोसोमल आरएनए के न्यूक्लियोटाइड अनुक्रमों के विश्लेषण से प्राप्त डेटा, पहले से अध्ययन की गई और नई पृथक बैक्टीरिया प्रजातियों के बारे में भी शामिल है। इस जानकारी के आधार पर, बैक्टीरिया के कुछ समूहों की प्रजातियों की संरचना, उदाहरण के लिए जीनस रोग-कीट, संशोधित किया जाएगा: कुछ प्रजातियाँ जीनस के भीतर ही रहेंगी रोग-कीट, और कुछ नई पीढ़ी बनाएंगे या बैक्टीरिया की पहले से मौजूद अन्य प्रजातियों को सौंपे जाएंगे। यह भी ध्यान दिया जाना चाहिए कि बैक्टीरिया के नए उपभेदों का वर्णन करने के लिए, एक नियम के रूप में, उनकी पहचान के लिए आवश्यक से अधिक विशेषताओं का अध्ययन किया जाता है, क्योंकि कुंजियों और तालिकाओं में पहचाने गए बैक्टीरिया की सभी विशेषताओं को शामिल नहीं किया जाता है, बल्कि केवल वे जो भिन्न होते हैं विभिन्न प्रजातियाँ (तालिका 1)।

तालिका 1 - आवश्यक डेटा की न्यूनतम सूची

बैक्टीरिया के नए उपभेदों का विवरण (एच. ट्रूपर, के. श्लेफ़र, 1992 के अनुसार)

गुण

मुख्य विशेषताएं

अतिरिक्त संकेत

कोशिका आकृति विज्ञान

रूप; आकार; गतिशीलता; इंट्रा- और बाह्यकोशिकीय संरचनाएं; कोशिकाओं की पारस्परिक व्यवस्था; सेलुलर भेदभाव; कोशिका विभाजन का प्रकार; कोशिका अल्ट्रास्ट्रक्चर

रंग; ध्वजारोहण की प्रकृति; विवाद; कैप्सूल; कवर; बहिर्वृद्धि; जीवन चक्र; हेटेरोसिस्ट; कशाभिका, झिल्ली और कोशिका भित्ति की संरचना

तालिका 1 की निरंतरता

विकास स्वरूप

ठोस और तरल पोषक मीडिया पर विकास की विशेषताएं; कॉलोनी आकृति विज्ञान

कॉलोनी का रंग, निलंबन

एसिड प्रतिरोध; बीजाणुओं का रंग, कशाभिका

कोशिका संरचना

डीएनए संरचना; अतिरिक्त पदार्थ

न्यूक्लिक एसिड की समरूपता; सेलुलर रंगद्रव्य; कोशिका भित्ति संरचना; विशिष्ट एंजाइम

शरीर क्रिया विज्ञान

तापमान से संबंध; पर्यावरण के पीएच तक; चयापचय का प्रकार (फोटोट्रॉफ़, केमोट्रॉफ़, लिथोट्रॉफ़, ऑर्गेनोट्रॉफ़); आणविक ऑक्सीजन से संबंध; इलेक्ट्रॉन स्वीकर्ता; कार्बन स्रोत; नाइट्रोजन स्रोत; सल्फर स्रोत

लवण या आसमाटिक कारकों की आवश्यकता; विकास कारकों की आवश्यकता; विशिष्ट चयापचय उत्पाद (एसिड, रंगद्रव्य, एंटीबायोटिक्स, विषाक्त पदार्थ); एंटीबायोटिक प्रतिरोध

परिस्थितिकी

रहने की स्थिति

रोगजनकता; मेज़बानों का घेरा; एंटीजन का गठन; सीरोलॉजी;

फ़ेज़ के प्रति संवेदनशीलता; सिम्बायोसिस

3 प्रयोगशाला कार्य "पहचान"।
सूक्ष्मजीव"

कार्य का लक्ष्य: सूक्ष्मजीवों की पहचान के बुनियादी सिद्धांतों से परिचित होना। प्रयोगशाला कार्य के दौरान, प्रत्येक छात्र बैक्टीरिया के तनाव का वर्णन करने और उसे जीनस स्तर तक पहचानने के लिए आवश्यक बैक्टीरिया के गुणों का अध्ययन करता है।

कार्य

1. पहचाने गए जीवाणु की शुद्धता निर्धारित करें और उसकी कोशिकाओं की आकृति विज्ञान का अध्ययन करें।

2. सांस्कृतिक गुणों का वर्णन करें।

3. पहचाने गए बैक्टीरिया के साइटोलॉजिकल गुणों का अध्ययन करें।

4. पहचाने जाने योग्य जीवाणुओं के शारीरिक और जैव रासायनिक गुणों का अध्ययन करें।

5. एंटीबायोटिक दवाओं के प्रति बैक्टीरिया की संवेदनशीलता निर्धारित करें।

6. तालिका भरें और सारांश प्रस्तुत करें।

3.1 पहचाने गए जीवाणु की शुद्धता का निर्धारण

और इसकी कोशिकाओं की आकृति विज्ञान का अध्ययन करना

सूक्ष्मजीवों की पहचान पर काम करने के लिए, प्रत्येक छात्र को एक जीवाणु संस्कृति (एक परखनली में तिरछे अगर माध्यम पर) प्राप्त होती है, जिसकी शुद्धता के लिए परीक्षण किया जाता है। यह कई तरीकों से किया जाता है: दृष्टिगत रूप से, पोषक माध्यम पर बुआई करके और माइक्रोस्कोपी द्वारा।

विकास स्वरूपपरिणामी जीवाणु को झुके हुए अगर माध्यम की सतह पर एक लकीर द्वारा देखा जाता है। यदि लाइन के साथ विकास एक समान नहीं है, तो फसल दूषित है। फिर कल्चर को उपयोग के लिए एक तिरछे माध्यम (मीट पेप्टोन एगर) पर एक टेस्ट ट्यूब में डाला जाता है
आगे के काम में, और शुद्धता की जांच करने के लिए (विकसित कॉलोनियों की एकरूपता द्वारा) थकावट लकीर विधि का उपयोग करके पेट्री डिश में एक ठोस माध्यम की सतह पर भी छान लें। टीका लगाए गए टेस्ट ट्यूब और बर्तनों को 2 से 3 दिनों की अवधि के लिए 30 डिग्री सेल्सियस के तापमान पर थर्मोस्टेट में रखा जाता है। एक टेस्ट ट्यूब में प्रारंभिक जीवाणु संस्कृति के शेष का उपयोग माइक्रोस्कोपी (जनसंख्या की रूपात्मक समरूपता के आधार पर) का उपयोग करके शुद्धता की जांच करने के लिए किया जाता है, साथ ही आकार, सापेक्ष स्थिति, कोशिकाओं की गतिशीलता और उनके आकार का अध्ययन करने के लिए भी किया जाता है। संस्कृति को "कुचल ड्रॉप" तैयारी और स्थिर, फुकसिन-दाग वाली कोशिकाओं की तैयारी का उपयोग करके सूक्ष्मदर्शी किया जाता है। परिणाम तालिका 2 के रूप में संकलित तालिका में दर्ज किए गए हैं।

तालिका 2 पहचाने गए जीवाणु के गुण

गुण

लक्षण

परिणाम

सांस्कृतिक गुण

आकार, मिमी

सतह

संरचना

स्थिरता

कोशिका आकृति विज्ञान और
कोशिका विज्ञान

कोशिकाओं का आकार एवं व्यवस्था

गतिशीलता

एंडोस्पोर्स की उपस्थिति

ग्राम स्टेन

एसिड प्रतिरोध पेंटिंग

शारीरिक और जैव रासायनिक गुण

आणविक से संबंध

ऑक्सीजन

ग्लूकोज माध्यम पर वृद्धि

जिलेटिन माध्यम पर विकास

दूध के साथ मध्यम वृद्धि

स्टार्च माध्यम पर वृद्धि

कैटालेज़ परीक्षण

एंटीबायोटिक संवेदनशीलता

3.2 सांस्कृतिक गुण

अगले पाठ में, पहचान योग्य जीवाणु के निलंबन के साथ बीजित पेट्री डिश की जांच की जाती है। किसी संस्कृति की शुद्धता की कसौटी विकसित उपनिवेशों की एकरूपता है। अनुभाग के अनुसार जीवाणु उपनिवेशों के सांस्कृतिक गुणों का वर्णन करें
स्क्रैप 2.1 और परिणाम तालिका 2 में दर्ज किए गए हैं।

3.3 पहचाने गए बैक्टीरिया के साइटोलॉजिकल गुणों का अध्ययन

3.3.1 एंडोस्पोर्स की उपस्थिति

एक ठोस माध्यम से कोशिकाओं की एक छोटी संख्या को नल के पानी की एक बूंद में कांच की स्लाइड पर एक लूप में रखा जाता है और एक धब्बा बनाया जाता है। स्मीयर को हवा में सुखाया जाता है, बर्नर की लौ में स्थिर किया जाता है और उस पर क्रोमिक एसिड का 5% घोल लगाया जाता है। 5...10 मिनट बाद इसे पानी से धो लें। तैयारी को फिल्टर पेपर की एक पट्टी से ढक दिया जाता है और कागज को ज़ीहल के कार्बोलिक फुकसिन से उदारतापूर्वक गीला कर दिया जाता है। तैयारी को आंच पर तब तक गर्म करें जब तक वाष्प दिखाई न दे (उबाल न आए), फिर इसे एक तरफ ले जाएं और डाई का एक नया भाग डालें। यह प्रक्रिया 7 मिनट तक की जाती है। यह महत्वपूर्ण है कि डाई वाष्पित हो जाए, लेकिन कागज सूख न जाए। ठंडा होने के बाद, इसे हटा दिया जाता है, तैयारी को पानी से धोया जाता है और फिल्टर पेपर से अच्छी तरह से पोंछ लिया जाता है।

यदि सभी ऑपरेशन सही ढंग से किए जाते हैं, तो रंग विपरीत हो जाता है, और चमकीले लाल बीजाणु साइटोप्लाज्म की नीली पृष्ठभूमि के खिलाफ स्पष्ट रूप से दिखाई देते हैं।

3.3.2 ग्राम दाग

3.3.2.1 पानी की एक बूंद में चिकनाई रहित कांच की स्लाइड पर एक पतला धब्बा बनाएं ताकि कोशिकाएं कांच की सतह पर समान रूप से वितरित हो जाएं और गुच्छे न बनें।

3.3.2.2 तैयारी को हवा में सुखाया जाता है, बर्नर की आंच पर रखा जाता है और 1...2 मिनट के लिए कार्बोलिक जेंटियन या क्रिस्टल वायलेट से रंगा जाता है।

3.3.2.3 फिर डाई को सूखा दिया जाता है और धब्बों को लूगोल के घोल से 1...2 मिनट तक उपचारित किया जाता है जब तक कि वे काले न हो जाएं।

3.3.2.4 लुगोल का घोल निकालें, 96% इथाइल अल्कोहल के साथ 0.5...1.0 मिनट के लिए तैयारी को ख़राब करें और तुरंत पानी से धो लें।

3.3.2.5 अतिरिक्त रूप से 1…2 मिनट के लिए पानी फुकसिन से रंगा गया।

3.3.2.6 डाई को सूखा दिया जाता है, तैयारी को पानी से धोया जाता है और सुखाया जाता है।

3.3.2.7 विसर्जन प्रणाली के साथ माइक्रोस्कोप।

जब सही ढंग से दाग लगाया जाता है, तो ग्राम-पॉजिटिव बैक्टीरिया नीले-बैंगनी, ग्राम-नकारात्मक होते हैं गुलाबी-लाल रंग.

विश्वसनीय परिणाम प्राप्त करने के लिए, युवा, सक्रिय रूप से बढ़ने वाली (आमतौर पर एक दिन पुरानी) संस्कृतियों से ग्राम स्टेनिंग के लिए स्मीयर तैयार करना आवश्यक है, क्योंकि पुरानी संस्कृतियों की कोशिकाएं कभी-कभी अस्थिर ग्राम प्रतिक्रिया देती हैं। यदि बैक्टीरियल फिल्म (स्मीयर) बहुत मोटी है और अल्कोहल ब्लीचिंग पूरी तरह से पूरी नहीं हुई है, तो ग्राम-नकारात्मक बैक्टीरिया ग्राम-पॉजिटिव बैक्टीरिया के रूप में प्रकट हो सकते हैं। यदि स्मीयर को अल्कोहल से ब्लीच किया जाए तो ग्राम-पॉजिटिव बैक्टीरिया ग्राम-नेगेटिव बैक्टीरिया के रूप में दिखाई दे सकते हैं।

3.3.3 एसिड प्रतिरोध के लिए पेंटिंग

अध्ययन किए जा रहे बैक्टीरिया का एक स्मीयर पानी की एक बूंद में वसा रहित ग्लास स्लाइड पर तैयार किया जाता है। तैयारी को हवा में सुखाया जाता है और बर्नर की लौ पर स्थापित किया जाता है। फिल्टर पेपर को स्मीयर पर रखा जाता है, तैयारी को ज़ीहल के कार्बोल फुकसिन से भर दिया जाता है और वाष्प दिखाई देने तक 2-3 बार गर्म किया जाता है, स्लाइड को बर्नर लौ के ऊपर चिमटी के साथ पकड़कर रखा जाता है। स्मीयर को बगल से देखकर वाष्प की उपस्थिति का पता लगाया जाता है और जब वे दिखाई देते हैं, तो उन्हें तुरंत एक तरफ रख दिया जाता है।
ओर दवा. तैयारी को ठंडा होने दें, फिल्टर पेपर हटा दें, डाई निकाल दें और स्मीयर को पानी से धो लें। तब
कोशिकाओं को एसिड के 5% घोल से रंग हटाया जाता है ग्लास स्लाइड को सल्फ्यूरिक एसिड के गिलास में 2-3 बार डुबोया जाता है,

उसे इसमें रखे बिना. तैयारी को फिर से पानी से अच्छी तरह से धोया जाता है और मेथिलीन ब्लू (लेफ़लर के अनुसार) के साथ 3 से 5 मिनट के लिए दाग दिया जाता है। पेंट को सूखा दिया जाता है, तैयारी को पानी से धोया जाता है, सुखाया जाता है और विसर्जन प्रणाली से जांच की जाती है। जब सही ढंग से दाग लगाया जाता है, तो एसिड-फास्ट बैक्टीरिया की कोशिकाएं लाल दिखाई देती हैं, जबकि गैर-एसिड-फास्ट बैक्टीरिया की कोशिकाएं लाल दिखाई देती हैं नीला।

3.3.4 गतिशीलता का निर्धारण

अध्ययन के तहत संस्कृति को चुभन विधि का उपयोग करके 0.2...0.5% अर्ध-तरल अगर के एक स्तंभ में टीका लगाया जाता है। विकास विशेषताओं को सबसे स्पष्ट रूप से प्रकट करने के लिए, पंचर टेस्ट ट्यूब की दीवार के करीब बनाया जाता है। बुआई को 24 घंटे के लिए थर्मोस्टेट में रखा जाता है। इस तरह से की गई बुआई से गतिशील सूक्ष्मजीवों की पहचान करना और उन्हें स्थिर सूक्ष्मजीवों से अलग करना संभव हो जाता है।

बैक्टीरिया के स्थिर रूप पंचर लाइन के साथ बढ़ते हैं, जिससे छोटे बेलनाकार या शंक्वाकार प्रकोप बनते हैं। वातावरण पूर्णतः पारदर्शी रहता है। इस तरह के टीकाकरण के दौरान मोबाइल सूक्ष्मजीव स्पष्ट गंदलापन पैदा करते हैं, जो माध्यम की पूरी मोटाई में कमोबेश समान रूप से फैलते हैं।

3.4 शारीरिक और जैव रासायनिक गुणों का अध्ययन

पहचाने जाने योग्य बैक्टीरिया

3.4.1 आणविक ऑक्सीजन से संबंध

आणविक ऑक्सीजन के संबंध में, सूक्ष्मजीवों को चार समूहों में विभाजित किया गया है: बाध्य एरोबेस, माइक्रोएरोफाइल्स, ऐच्छिक एरोबेस (अवायवीय) और बाध्य अवायवीय जीव. न्यायाधीश को
यह निर्धारित करने के लिए कि क्या सूक्ष्मजीव एक समूह या किसी अन्य से संबंधित हैं, माइक्रोबियल सस्पेंशन को 45 डिग्री सेल्सियस के तापमान तक ठंडा किए गए पिघले हुए अगर पोषक माध्यम के साथ परीक्षण ट्यूबों में डाला जाता है। बुआई इंजेक्शन द्वारा भी की जा सकती है। सख्त एरोबमाध्यम की सतह पर और ऊपरी परत में उगें, माइक्रोएरोफाइल- सतह से कुछ दूरी पर. एछिक अवायुजीवआमतौर पर माध्यम की संपूर्ण मोटाई में विकसित होता है। सख्त अवायवीयकेवल माध्यम की गहराई में, परखनली के बिल्कुल नीचे उगें (चित्र 6)।


1 - एरोबिक्स; 2 - माइक्रोएरोफाइल्स; 3 - एछिक अवायुजीव;

4 – अवायवीय

चित्र 6 - इंजेक्शन द्वारा बुआई के दौरान सूक्ष्मजीवों की वृद्धि ( ) और जब पिघले हुए घने माध्यम में बुआई की जाती है ( बी)

3.4.2 ग्लूकोज और पेप्टोन मीडिया पर वृद्धि

कल्चर को एक बाँझ लूप के साथ एक तरल माध्यम में पेश किया जाता है: 5.0 ग्राम/लीटर पेप्टोन, 1.0 ग्राम/लीटर K2HP04, 10.0 ग्राम/लीटर ग्लूकोज, 2 मिली ब्रोमोथिमोल ब्लू (1.6% अल्कोहल घोल), आसुत जल को टेस्ट ट्यूब में डाला जाता है ( 8...10 मिली प्रत्येक) फ्लोट्स के साथ। 30 डिग्री सेल्सियस के तापमान पर थर्मोस्टेट में खेती की अवधि 7 दिन है। सूक्ष्मजीवों की वृद्धि या उनकी अनुपस्थिति माध्यम की मैलापन, फिल्म या तलछट के गठन से निर्धारित होती है। संकेतक के रंग में परिवर्तन (ब्रोमोथिमोल नीला) अम्लीय (माध्यम का पीला रंग) या क्षारीय (माध्यम का नीला रंग) चयापचय उत्पादों के गठन को इंगित करता है। गैस के बनने का संकेत उसके फ्लोट में जमा होने से होता है। अवलोकन परिणामों की तुलना बाँझ वातावरण से की जाती है।

3.4.3 जिलेटिन माध्यम पर वृद्धि

सूक्ष्मजीवों में बाह्यकोशिकीय प्रोटियोलिटिक एंजाइमों की गतिविधि एक सब्सट्रेट के रूप में जिलेटिन, कैसिइन या अन्य प्रोटीन का उपयोग करके निर्धारित की जाती है। जिलेटिन वाले माध्यम में मांस-पेप्टोन शोरबा (एमपीबी) और 10...15% जिलेटिन (एमपीबी) होता है। बुआई इंजेक्शन द्वारा की जाती है।

बैक्टीरियोलॉजिकल सुई का उपयोग करके, माइक्रोबियल कोशिकाओं को शोल से बाँझ रूप से चुना जाता है और सुई को ट्यूब के नीचे एमपीजेड कॉलम की मोटाई में डाला जाता है।

कमरे के तापमान पर खेती की अवधि 7 से 10 दिनों तक होती है। जिलेटिन का द्रवीकरण दृष्टिगत रूप से नोट किया जाता है। यदि जिलेटिन द्रवित होता है, तो द्रवीकरण की तीव्रता और रूप को इंगित करें - परत-दर-परत, फ़नल-आकार, बैग-आकार, गड्ढा-आकार, शलजम-आकार, बुलबुला-आकार।

3.4.4 दूध के साथ माध्यम पर वृद्धि

दूध कैसिइन को विघटित करने के लिए बैक्टीरिया की क्षमता निर्धारित करने के लिए पेट्री डिश में "मिल्क एगर" पर बुआई की जाती है। माध्यम में बाँझ स्किम दूध और बाँझ 3% जलीय अगर अगर के बराबर भाग होते हैं। बैक्टीरिया को एक लूप के साथ टीका लगाया जाता है, कप के व्यास के साथ या उस सेक्टर के केंद्र के साथ एक स्ट्रोक खींचा जाता है जिसमें कप विभाजित होता है। 30 डिग्री सेल्सियस पर थर्मोस्टेट में बैक्टीरिया की खेती की अवधि 7 दिन है। कैसिइन हाइड्रोलिसिस का पता कॉलोनियों के आसपास के माध्यम के साफ़ होने के क्षेत्र या लाइन के साथ उगने वाले सूक्ष्मजीवों की संस्कृति से लगाया जाता है। 5% ट्राइक्लोरोएसेटिक एसिड के घोल से विकसित बैक्टीरिया वाले माध्यम का उपचार करने के बाद क्षेत्र विशेष रूप से स्पष्ट रूप से दिखाई देता है। कैसिइन के हाइड्रोलिसिस क्षेत्र को लकीर या कॉलोनी के किनारे से प्रकाश क्षेत्र की सीमा तक मिलीमीटर में मापा जाता है। प्रकाश क्षेत्र का व्यास जितना बड़ा होगा, बैक्टीरिया की कैसिनोलिटिक गतिविधि उतनी ही अधिक होगी।

3.4.5 स्टार्च माध्यम पर वृद्धि

स्टार्च (पेट्री डिश में) युक्त (जी/एल): पेप्टोन के साथ आगर माध्यम पर बुआई 10.0; KN2R04 5.0; घुलनशील स्टार्च 2.0; आगर 15.0; पीएच 6.8 7.0, सूक्ष्मजीवों द्वारा एमाइलेज़ के गठन को निर्धारित करने के लिए उत्पादित किया जाता है। बैक्टीरिया को एक लूप के साथ टीका लगाया जाता है, कप के व्यास के साथ या उस सेक्टर के केंद्र के साथ एक स्ट्रोक खींचा जाता है जिसमें कप विभाजित होता है। 30 डिग्री सेल्सियस के तापमान पर थर्मोस्टेट में बैक्टीरिया की खेती की अवधि 7 दिन है। लूगोल के घोल से विकसित बैक्टीरिया वाले माध्यम का उपचार करने के बाद स्टार्च हाइड्रोलिसिस का पता लगाया जाता है। ऐसा करने के लिए, माध्यम की सतह पर 3 से 5 मिलीलीटर लुगोल का घोल डालें। स्टार्च युक्त माध्यम नीला हो जाता है, और यदि स्टार्च को डेक्सट्रिन में हाइड्रोलाइज किया गया है तो हाइड्रोलिसिस क्षेत्र रंगहीन रहता है या लाल-भूरे रंग का हो जाता है। स्टार्च हाइड्रोलिसिस ज़ोन को स्ट्रीक (कॉलोनी) के किनारे से प्रकाश क्षेत्र (मिमी) की सीमा तक मापा जाता है। प्रकाश क्षेत्र का व्यास जितना बड़ा होगा, एमाइलेज गतिविधि उतनी ही अधिक होगी।

3.4.6 कैटालेज़ परीक्षण

उगाए गए कल्चर के एक हिस्से को कांच की स्लाइड पर 3% हाइड्रोजन पेरोक्साइड की एक बूंद में बैक्टीरियोलॉजिकल लूप का उपयोग करके निलंबित कर दिया जाता है। कैटालेज़ की उपस्थिति का संकेत गैस के बुलबुले के गठन से होता है, जिसे बैक्टीरिया के प्रवेश के 1...5 मिनट बाद नग्न आंखों से या कम आवर्धन पर माइक्रोस्कोप के नीचे देखा जाता है। आप हाइड्रोजन पेरोक्साइड की कुछ बूँदें सीधे आगर तिरछी जगह पर उगी कॉलोनी या कल्चर पर लगा सकते हैं और आणविक ऑक्सीजन की रिहाई का निरीक्षण कर सकते हैं।

3.4.7 जीवाणु संवेदनशीलता का निर्धारण
एंटीबायोटिक्स के लिए

एंटीबायोटिक दवाओं के प्रति सूक्ष्मजीवों की संवेदनशीलता को कुछ एंटीबायोटिक दवाओं के साथ तैयार तैयार पेपर डिस्क का उपयोग करके आसानी से निर्धारित किया जा सकता है। अध्ययन के तहत सूक्ष्मजीवों को उचित ठोस पोषक माध्यम पर उगाया जाता है। अध्ययन किए जा रहे सूक्ष्मजीव का एक गाढ़ा निलंबन बाँझ नल के पानी में कोशिकाओं को ठोस पोषक माध्यम की सतह से पानी से धोकर तैयार किया जाता है। बर्नर लौ के पास काम करते हुए, परिणामी निलंबन का 1 मिलीलीटर जोड़ें
एक परखनली में 20 मिलीलीटर पिघला हुआ और 50 ºC अगर माध्यम के तापमान पर ठंडा किया जाए, उदाहरण के लिए, मांस पेप्टोन अगर (एमपीए)। यदि सूक्ष्मजीवों को तरल पोषक माध्यम में उगाया गया था, तो संस्कृति की उचित मात्रा को अगर में जोड़ा जाता है। ट्यूब की सामग्री को जल्दी और अच्छी तरह से मिश्रित किया जाता है और एक बाँझ पेट्री डिश में डाला जाता है।

जब माध्यम सख्त हो जाता है, तो कागज को उसकी सतह पर रख दिया जाता है।
ny डिस्क एक दूसरे से समान दूरी पर और दूरी पर

कप के किनारे से 1.5...2.0 सेमी. अगर माध्यम की मोटाई में एंटीबायोटिक दवाओं के बेहतर प्रसार के लिए पेट्री डिश को कमरे के तापमान पर 2 घंटे के लिए रखा जाता है, और फिर, बिना उलटे, उन्हें 30 डिग्री सेल्सियस के तापमान पर 24 घंटे के लिए थर्मोस्टेट में रखा जाता है। एक दिन बाद, डिस्क के चारों ओर अध्ययन किए गए सूक्ष्मजीवों के विकास के दमन के क्षेत्रों का गठन नोट किया गया है। यदि अध्ययन के तहत जीवाणु कुछ एंटीबायोटिक दवाओं के प्रति संवेदनशील है, तो डिस्क के आसपास संस्कृति की कोई वृद्धि नहीं होने वाले क्षेत्र पाए जाते हैं। विकास अवरोध क्षेत्र का व्यास एक मिलीमीटर रूलर से मापा जाता है और परिणाम तालिका 3 में दर्ज किए जाते हैं। 30 मिमी से अधिक का क्षेत्र इंगित करता है
एंटीबायोटिक के प्रति सूक्ष्मजीवों की उच्च संवेदनशीलता को इंगित करता है, और 12 मिमी से कम कमजोर संवेदनशीलता को इंगित करता है।

जब प्रयोगकर्ता के पास समाधान उपलब्ध हो
एंटीबायोटिक पदार्थ या कल्चर तरल पदार्थ युक्त

एंटीबायोटिक, अगर की मोटाई में कुओं का उपयोग करके एक विधि का उपयोग करें।
इस मामले में, परीक्षण सूक्ष्मजीव से संक्रमित जमे हुए अगर माध्यम में, डिश के किनारे से 1.5...2.0 सेमी की दूरी पर एक बाँझ प्लग ड्रिल (6 से 8 मिमी व्यास) के साथ छेद किए जाते हैं।
कुओं में एंटीबायोटिक घोल या कल्चर तरल मिलाया जाता है। यह विधि तरल माध्यम में विकसित सूक्ष्मजीवों की एंटीबायोटिक पदार्थ बनाने की क्षमता की पहचान करना भी संभव बनाती है।

टेबल तीन जीवाणु वृद्धि पर एंटीबायोटिक्स का प्रभाव

एंटीबायोटिक दवाओं

विकास अवरोध क्षेत्रों का व्यास, मिमी

पेनिसिलिन डिस्क

क्लोरैम्फेनिकॉल के साथ डिस्क

4 परीक्षण प्रश्न

1. निम्नलिखित शब्दों को परिभाषित करें:

- छानना; प्रामाणिक तनाव; तनाव प्रकार;

- कालोनी;

– सांस्कृतिक गुण;

– वर्गीकरण;

– वर्गीकरण;

- नामपद्धति;

– प्लाज्मिड;

- फेज टाइपिंग.

2. सूक्ष्मजीवों के वर्गीकरण में कौन से अनुभाग शामिल हैं? उनकी विशेषताएँ बताइये।

3. सूक्ष्मजीवों के वर्गीकरण की मौजूदा प्रणालियाँ कृत्रिम क्यों हैं?

5. वे कौन सी विशेषताएँ हैं जो एक ही प्रकार के सूक्ष्मजीवों के विभिन्न उपभेदों को अलग करती हैं?

6. सूक्ष्मजीवों की कौन सी वर्गीकरण श्रेणियों को अनिवार्य के रूप में वर्गीकृत किया गया है और किसे वैकल्पिक के रूप में वर्गीकृत किया गया है?

7. सूक्ष्मजीवों के नामकरण के लिए बुनियादी नियमों की सूची बनाएं।

8. सूक्ष्मजीवों की पहचान करने का मुख्य उद्देश्य क्या है?

9. प्रोकैरियोट्स और यूकेरियोट्स के विभिन्न समूहों के वर्गीकरण और पहचान के सिद्धांत कैसे भिन्न हैं?

10. बैक्टीरिया का वर्णन और पहचान करते समय किन गुणों का अध्ययन किया जाता है?

11. सूक्ष्मजीवों की सतह, गहरी और निचली कॉलोनियों का वर्णन करते समय किन संकेतों को ध्यान में रखा जाता है?

12. स्ट्रोक द्वारा सूक्ष्मजीवों की वृद्धि का वर्णन करते समय किन विशेषताओं पर ध्यान दिया जाता है?

13. तरल पोषक माध्यम में सूक्ष्मजीवों की वृद्धि को चिह्नित करते समय क्या ध्यान दिया जाता है?

14. जीवाणु कोशिकाओं की रूपात्मक विशेषताओं और संगठन में कौन-सी विशेषताएँ शामिल हैं?

15. बैक्टीरिया की पहचान करते समय किन शारीरिक और जैव रासायनिक गुणों का अध्ययन किया जाता है?

16. किन मामलों में केमोटैक्सोनोमिक विधियों का उपयोग करना आवश्यक है?

17. कीमो-टैक्सोनोमिक मार्कर के रूप में उपयोग किए जाने वाले पदार्थों के उदाहरण दें?

18. प्रोटीन वर्गीकरण की विशेषताएं क्या हैं?

19. संख्यात्मक वर्गीकरण की विधि का वर्णन करें, इसकी क्या सीमाएँ हैं?

20. बैक्टीरिया के फ़ाइलोजेनेटिक संबंधों का मूल्यांकन करने के लिए किन तरीकों का उपयोग किया जाता है?

21. डीएनए जांच विधि का सार क्या है और विधि से इसका अंतर क्या है?
डीएनए-डीएनए संकरण?

22. राइबोसोमल आरएनए में न्यूक्लियोटाइड अनुक्रमों का विश्लेषण करने की विधि की विशेषताएं क्या हैं?

23. "बर्गीज़ गाइड टू बैक्टीरिया" में बैक्टीरिया के वर्गीकरण का आधार कौन से संकेत हैं?

24. बैक्टीरिया के नए उपभेदों का वर्णन करते समय किन गुणों और विशेषताओं का अध्ययन किया जाता है?

25. किसी पहचाने गए जीवाणु की शुद्धता निर्धारित करने की क्या विधियाँ हैं?

26. ग्राम स्टेनिंग तकनीक को निष्पादित करने के लिए बुनियादी नियम क्या हैं?

27. आणविक ऑक्सीजन के संबंध में सूक्ष्मजीवों को किन समूहों में विभाजित किया गया है?

28. सूक्ष्मजीवों में बाह्यकोशिकीय प्रोटोलिटिक एंजाइमों की गतिविधि का निर्धारण करते समय सब्सट्रेट के रूप में क्या उपयोग किया जाता है?

29. एंटीबायोटिक दवाओं के प्रति सूक्ष्मजीवों की संवेदनशीलता निर्धारित करने के लिए आप कौन सी विधियाँ जानते हैं? उनकी विशेषताएँ बताइए।

30. सूक्ष्मजीवों द्वारा एमाइलेज के उत्पादन को निर्धारित करने के लिए किस विधि का उपयोग किया जाता है?

31. बीजारोपण से गतिशील सूक्ष्मजीवों को गतिहीन सूक्ष्मजीवों से पहचानना और अलग करना कैसे संभव हो जाता है?

रंगों और पोषक तत्वों के 5 व्यंजन

5.1 बेसिक कार्बोलिक फुकसिन (सिल्या फुकसिन)

- ताजा आसुत फिनोल का 5% जलीय घोल - 100 मिलीलीटर;

- बेसिक फुकसिन का संतृप्त अल्कोहल समाधान - 10 मिली;

तैयार मिश्रण को 48 घंटे बाद छान लिया जाता है.

5.2 मेथिलीन नीला (लेफ़लर)

- मेथिलीन ब्लू का संतृप्त अल्कोहल घोल - 30 मिली;

- आसुत जल - 100 मिलीलीटर;

- KOH का 1% जलीय घोल - 1 मिली।

5.3 मांस पेप्टोन शोरबा (एमपीबी)

वसा और टेंडन के बिना 500 ग्राम कीमा बनाया हुआ मांस 1 लीटर नल के पानी में डाला जाता है और 12 घंटे के लिए कमरे के तापमान पर या थर्मोस्टेट में 2 घंटे के लिए 37 डिग्री सेल्सियस के तापमान पर और एक घंटे के लिए 50 डिग्री सेल्सियस के तापमान पर निकाला जाता है। फिर मांस को चीज़क्लोथ के माध्यम से निचोड़ा जाता है, और परिणामस्वरूप जलसेक को 30 मिनट तक उबाला जाता है। इस मामले में, प्रोटीन जम जाता है। ठंडे द्रव्यमान को एक कपास फिल्टर के माध्यम से फ़िल्टर किया जाता है और मूल मात्रा में पानी के साथ मिलाया जाता है। इसके बाद, 1 लीटर मांस शोरबा में 5 से 10 ग्राम पेप्टोन और 5 ग्राम टेबल नमक मिलाएं। माध्यम को लगातार हिलाते हुए, पेप्टोन के घुलने तक गर्म किया जाता है। एमपीबी को 2 एटीएम के दबाव पर 20 मिनट तक स्टरलाइज़ किया जाता है।

5.4 मांस पेप्टोन अगर (एमपीए)

1 लीटर एमपीबी में 20 ग्राम अगर मिलाएं। माध्यम को तब तक गर्म किया जाता है जब तक कि आगर घुल न जाए, फिर माध्यम थोड़ा क्षारीय हो जाता है।

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2007

सूक्ष्मजीवों के प्रतिजन

प्रत्येक सूक्ष्मजीव, चाहे वह कितना भी आदिम क्यों न हो, उसमें कई एंटीजन होते हैं। इसकी संरचना जितनी जटिल होगी, इसकी संरचना में उतने ही अधिक एंटीजन पाए जा सकते हैं।

एक ही व्यवस्थित श्रेणियों से संबंधित विभिन्न सूक्ष्मजीवों में, समूह-विशिष्ट एंटीजन प्रतिष्ठित होते हैं - वे एक ही जीनस या परिवार की विभिन्न प्रजातियों में पाए जाते हैं, प्रजाति-विशिष्ट - एक ही प्रजाति के विभिन्न प्रतिनिधियों में, और प्रकार-विशिष्ट (संस्करण) एंटीजन होते हैं। - एक ही और एक ही प्रकार के विभिन्न प्रकारों में। उत्तरार्द्ध को सीरोलॉजिकल वेरिएंट या सेरोवर्स में विभाजित किया गया है। जीवाणु प्रतिजनों में H, O, K आदि होते हैं।

फ्लैगेलर एच-एंटीजन। जैसा कि नाम से पता चलता है, ये एंटीजन बैक्टीरियल फ्लैगेल्ला का हिस्सा हैं। एच-एंटजेन एक फ्लैगेलिन प्रोटीन है। गर्म करने पर यह नष्ट हो जाता है और फिनोल से उपचार के बाद यह अपने एंटीजेनिक गुणों को बरकरार रखता है।

दैहिक ओ-एंटीजन। पहले, यह माना जाता था कि ओ-एंटीजन कोशिका की सामग्री, उसके सोमा में निहित था, और इसलिए इसे दैहिक एंटीजन कहा जाता था। यह एंटीजन बाद में जीवाणु कोशिका दीवार से जुड़ा हुआ पाया गया।

ग्राम-नेगेटिव बैक्टीरिया का ओ-एंटीजन कोशिका भित्ति के एलपीएस से जुड़ा होता है। इस सन्निहित जटिल प्रतिजन के निर्धारक समूह इसके मुख्य भाग से जुड़ी पॉलीसेकेराइड श्रृंखलाओं की टर्मिनल दोहराई जाने वाली इकाइयाँ हैं। निर्धारक समूहों में शर्करा की संरचना, साथ ही उनकी संख्या, विभिन्न जीवाणुओं में भिन्न होती है। अधिकतर उनमें हेक्सोज (गैलेक्टोज, ग्लूकोज, रैम्नोज, आदि), अमीनो शुगर (एम-एसिटाइलग्लुकोसामाइन) होते हैं। ओ-एंटीजन थर्मल रूप से स्थिर है: इसे 1-2 घंटे तक उबालने पर संरक्षित रखा जाता है, और फॉर्मेल्डिहाइड और इथेनॉल के साथ उपचार के बाद नष्ट नहीं होता है। जब जानवरों को फ्लैगेला वाले जीवित कल्चर से प्रतिरक्षित किया जाता है, तो ओ- और एच-एंटीजन के प्रति एंटीबॉडी बनते हैं, और जब उबले हुए कल्चर से प्रतिरक्षित किया जाता है, तो केवल ओ-एंटीजन के प्रति एंटीबॉडी बनते हैं।

के-एंटीजन (कैप्सूल)। एस्चेरिचिया और साल्मोनेला में इन एंटीजन का अच्छी तरह से अध्ययन किया गया है। वे, ओ-एंटीजन की तरह, कोशिका भित्ति और कैप्सूल के एलपीएस से निकटता से जुड़े होते हैं, लेकिन ओ-एंटीजन के विपरीत उनमें मुख्य रूप से अम्लीय नॉलिसैकेराइड होते हैं: ग्लुकुरोनिक, गैलेक्टुरोनिक और अन्य यूरोनिक एसिड। तापमान के प्रति उनकी संवेदनशीलता के आधार पर, K-एंटीजन को A-, B- और L-एंटीजन में विभाजित किया जाता है। सबसे थर्मोस्टेबल ए-एंटीजन हैं, जो 2 घंटे से अधिक समय तक उबलने का सामना कर सकते हैं। बी-एंटीजन एक घंटे के लिए 60 डिग्री सेल्सियस के तापमान पर हीटिंग का सामना कर सकते हैं, और एल-एंटीजन 60 डिग्री सेल्सियस तक गर्म होने पर नष्ट हो जाते हैं।

के-एंटीजन ओ-एंटीजन की तुलना में अधिक सतही रूप से स्थित होते हैं और अक्सर बाद वाले को छिपा देते हैं। इसलिए, ओ-एंटीजन की पहचान करने के लिए, पहले के-एंटीजन को नष्ट करना आवश्यक है, जो संस्कृतियों को उबालकर प्राप्त किया जाता है। कैप्सूल एंटीजन में तथाकथित वीआई एंटीजन शामिल है। यह टाइफाइड और कुछ अन्य एंटरोबैक्टीरिया में पाया जाता है जो अत्यधिक विषैले होते हैं, और इसलिए इस एंटीजन को विषाणु एंटीजन कहा जाता है।

पॉलीसेकेराइड प्रकृति के कैप्सुलर एंटीजन की पहचान न्यूमोकोकी, क्लेबसिएला और अन्य बैक्टीरिया में की गई है जो एक स्पष्ट कैप्सूल बनाते हैं। समूह-विशिष्ट ओ-एंटीजन के विपरीत, वे अक्सर किसी दी गई प्रजाति के कुछ उपभेदों (वेरिएंट) की एंटीजेनिक विशेषताओं की विशेषता बताते हैं, जो इस आधार पर सेरोवर्स में विभाजित होते हैं। एंथ्रेक्स बेसिली में, कैप्सुलर एंटीजन में पॉलीपेप्टाइड होते हैं।

जीवाणु विषाक्त पदार्थों के एंटीजन। यदि बैक्टीरियल विषाक्त पदार्थ प्रोटीन प्रकृति के घुलनशील यौगिक हैं तो उनमें पूर्ण एंटीजेनिक गुण होते हैं।

बैक्टीरिया द्वारा उत्पादित एंजाइमों में रोगजनन कारकों सहित पूर्ण विकसित एंटीजन के गुण होते हैं।

सुरक्षात्मक एंटीजन। सबसे पहले एंथ्रेक्स के दौरान प्रभावित ऊतकों के स्राव में खोजा गया। उन्होंने दृढ़ता से एंटीजेनिक गुण व्यक्त किए हैं, जो संबंधित संक्रामक एजेंट को प्रतिरक्षा प्रदान करते हैं। कुछ अन्य सूक्ष्मजीव भी मेजबान के शरीर में प्रवेश करने पर सुरक्षात्मक एंटीजन बनाते हैं, हालांकि ये एंटीजन उनके स्थायी घटक नहीं होते हैं।

वायरस के एंटीजन. किसी भी वायरस के प्रत्येक विषाणु में अलग-अलग एंटीजन होते हैं। उनमें से कुछ वायरस-विशिष्ट हैं। अन्य एंटीजन में मेजबान कोशिका घटक (लिपिड, कार्बोहाइड्रेट) शामिल हैं, जो इसके बाहरी आवरण में शामिल हैं। सरल विषाणुओं के एंटीजन उनके न्यूक्लियोकैप्सिड से जुड़े होते हैं। उनकी रासायनिक संरचना के अनुसार, वे राइबोन्यूक्लियोप्रोटीन या डीऑक्सीराइबोन्यूक्लियोप्रोटीन से संबंधित हैं, जो घुलनशील यौगिक हैं और इसलिए उन्हें एस-एंटीजन (सॉल्यूटियो-सॉल्यूशन) के रूप में नामित किया गया है। जटिल विषाणुओं में, कुछ एंटीजेनिक घटक न्यूक्लियोकैप्सिड से जुड़े होते हैं, अन्य बाहरी आवरण के ग्लाइकोप्रोटीन से जुड़े होते हैं। कई सरल और जटिल विषाणुओं में विशेष सतह वी-एंटीजन - हेमाग्लगुटिनिन और एंजाइम न्यूरोमिनिडेज़ होते हैं। हेमाग्लगुटिनिन की एंटीजेनिक विशिष्टता विभिन्न वायरस में भिन्न होती है। इस एंटीजन का पता हेमग्लूटीनेशन प्रतिक्रिया या इसके प्रकार - हेमैडसोरशन प्रतिक्रिया में लगाया जाता है। हेमाग्लगुटिनिन की एक अन्य विशेषता एंटीबॉडी के निर्माण के कारण एंटीजेनिक कार्य में प्रकट होती है - एंटीहेमाश्पोटिनिन और हेमाग्लगुटिनेशन निषेध प्रतिक्रिया (एचआरआई) में उनके साथ बातचीत करना।

वायरल एंटीजन समूह-विशिष्ट हो सकते हैं, यदि वे एक ही जीनस या परिवार की विभिन्न प्रजातियों में पाए जाते हैं, और प्रकार-विशिष्ट, एक ही प्रजाति के व्यक्तिगत उपभेदों में निहित होते हैं। वायरस की पहचान करते समय इन अंतरों को ध्यान में रखा जाता है।

सूचीबद्ध एंटीजन के साथ, मेजबान सेल एंटीजन वायरल कणों में मौजूद हो सकते हैं। उदाहरण के लिए, मुर्गी के भ्रूण की एलांटोइक झिल्ली पर विकसित इन्फ्लूएंजा वायरस, एलांटोइक द्रव के लिए प्राप्त एंटीसेरम के साथ प्रतिक्रिया करता है। संक्रमित चूहों के फेफड़ों से लिया गया वही वायरस, इन जानवरों के फेफड़ों में एंटीसीरम के साथ प्रतिक्रिया करता है और एलेंटोइक तरल पदार्थ में एंटीसीरम के साथ प्रतिक्रिया नहीं करता है।

विषम प्रतिजन (हेटरोएंटीजन)। विभिन्न प्रकार के सूक्ष्मजीवों, जानवरों और पौधों के प्रतिनिधियों में पाए जाने वाले सामान्य एंटीजन को विषमांगी कहा जाता है। उदाहरण के लिए, विषम फ़ोर्समैन एंटीजन गिनी पिग अंगों की प्रोटीन संरचनाओं, भेड़ एरिथ्रोसाइट्स और साल्मोनेला में पाया जाता है।

मानव शरीर के एंटीजन

मानव शरीर के सभी ऊतकों और कोशिकाओं में एंटीजेनिक गुण होते हैं। कुछ एंटीजन सभी स्तनधारियों के लिए विशिष्ट होते हैं, अन्य मनुष्यों के लिए प्रजाति-विशिष्ट होते हैं, और अन्य कुछ समूहों के लिए होते हैं; उन्हें आइसोएंटीजन कहा जाता है (उदाहरण के लिए, रक्त समूह एंटीजन)। केवल किसी दिए गए जीव की विशेषता वाले एंटीजन को एलोएंटीजन (ग्रीक एलोस - अन्य) कहा जाता है। इनमें हिस्टोकंपैटिबिलिटी एंटीजन शामिल हैं - प्रमुख हिस्टोकंपैटिबिलिटी कॉम्प्लेक्स एमएचसी (मेजर हिस्टोकंपैटिबिलिटी कॉम्प्लेक्स) के जीन के उत्पाद, प्रत्येक व्यक्ति की विशेषता। अलग-अलग व्यक्तियों के एंटीजन जिनमें कोई अंतर नहीं होता, सिन्जेनिक कहलाते हैं। अंगों और ऊतकों में, अन्य प्रतिजनों के अलावा, विशिष्ट अंग और ऊतक प्रतिजन भी होते हैं। एक ही नाम के मानव और पशु ऊतकों में एंटीजेनिक समानता होती है। ऐसे चरण-विशिष्ट एंटीजन होते हैं जो ऊतक या कोशिका विकास के व्यक्तिगत चरणों में प्रकट होते हैं और गायब हो जाते हैं। प्रत्येक कोशिका में बाहरी झिल्ली, साइटोप्लाज्म, नाभिक और अन्य घटकों की विशेषता वाले एंटीजन होते हैं।

प्रत्येक जीव के एंटीजन आम तौर पर उसमें प्रतिरक्षात्मक प्रतिक्रिया नहीं करते हैं, क्योंकि शरीर उनके प्रति सहनशील होता है। हालाँकि, कुछ शर्तों के तहत उनमें विदेशीता के लक्षण आ जाते हैं और वे स्वप्रतिजन बन जाते हैं, और उनके विरुद्ध जो प्रतिक्रिया उत्पन्न होती है उसे स्वप्रतिरक्षी कहा जाता है।

ट्यूमर एंटीजन और एंटीट्यूमर इम्युनिटी। घातक ट्यूमर कोशिकाएं शरीर में सामान्य कोशिकाओं के भिन्न रूप हैं। इसलिए, उनकी विशेषता उन ऊतकों के एंटीजन से होती है

जिनसे उनकी उत्पत्ति हुई, साथ ही ट्यूमर-विशिष्ट एंटीजन जो सभी कोशिका एंटीजन का एक छोटा सा हिस्सा बनाते हैं। कार्सिनोजेनेसिस के दौरान, कोशिकाओं का विभेदन होता है, इसलिए कुछ एंटीजन की हानि और भ्रूण (भ्रूणप्रोटीन) सहित अपरिपक्व कोशिकाओं की विशेषता वाले एंटीजन की उपस्थिति हो सकती है। ट्यूमर-विशिष्ट एंटीजन केवल किसी दिए गए प्रकार के ट्यूमर के लिए और अक्सर किसी व्यक्ति के ट्यूमर के लिए विशिष्ट होते हैं। वायरस से प्रेरित ट्यूमर में वायरल एंटीजन हो सकते हैं जो किसी दिए गए वायरस से प्रेरित सभी ट्यूमर में समान होते हैं। एंटीबॉडी के प्रभाव में, एक बढ़ता हुआ ट्यूमर अपनी एंटीजेनिक संरचना को बदल सकता है।

ट्यूमर रोग के प्रयोगशाला निदान में रक्त सीरम में ट्यूमर की विशेषता वाले एंटीजन की पहचान शामिल है। इस उद्देश्य के लिए, चिकित्सा उद्योग वर्तमान में एंजाइम इम्यूनोएसे, रेडियोइम्यूनोएसे और इम्यूनोलुमिनसेंस विश्लेषण का उपयोग करके एंटीजन का पता लगाने के लिए सभी आवश्यक सामग्रियों से युक्त डायग्नोस्टिक किट तैयार कर रहा है।

ट्यूमर के विकास के प्रति शरीर की प्रतिरोधक क्षमता प्राकृतिक हत्यारी कोशिकाओं की कार्रवाई से सुनिश्चित होती है, जो रक्त और शरीर के सभी ऊतकों में लगातार घूमने वाले सभी लिम्फोसाइटों का 15% हिस्सा बनाती हैं। नेचुरल किलर कोशिकाएं (एनके) शरीर की सामान्य कोशिकाओं से ट्यूमर कोशिकाओं सहित विदेशीता के लक्षण वाली किसी भी कोशिका को अलग करने और विदेशी कोशिकाओं को नष्ट करने की क्षमता रखती हैं। तनावपूर्ण स्थितियों, बीमारियों, प्रतिरक्षादमनकारी प्रभावों और कुछ अन्य स्थितियों में, एनके की संख्या और गतिविधि कम हो जाती है और यह ट्यूमर के विकास की शुरुआत के कारणों में से एक है। ट्यूमर के विकास के दौरान, इसके एंटीजन एक प्रतिरक्षाविज्ञानी प्रतिक्रिया का कारण बनते हैं, लेकिन यह आमतौर पर ट्यूमर के विकास को रोकने के लिए अपर्याप्त है। इस घटना के कारण असंख्य हैं और अच्छी तरह समझे नहीं गए हैं। इसमे शामिल है:

शरीर के सामान्य एंटीजन के निकट होने के कारण ट्यूमर एंटीजन की कम इम्युनोजेनेसिटी, जिसके प्रति शरीर सहनशील होता है;

सकारात्मक प्रतिक्रिया के बजाय सहिष्णुता का विकास;

हास्य प्रकार की प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया का विकास, जबकि केवल सेलुलर तंत्र ही ट्यूमर को दबा सकते हैं;

एक घातक ट्यूमर द्वारा उत्पन्न प्रतिरक्षादमनकारी कारक।

ट्यूमर की कीमोथेरेपी और रेडियोथेरेपी, सर्जिकल हस्तक्षेप के दौरान तनावपूर्ण स्थितियां अतिरिक्त कारक हो सकती हैं जो शरीर की प्रतिरक्षा रक्षा को कम करती हैं। एंटीट्यूमर प्रतिरोध के स्तर को बढ़ाने के उपायों में इम्यूनोस्टिम्युलेटिंग एजेंटों का उपयोग, साइटोकिन तैयारी, रोगी के रक्तप्रवाह में वापसी के साथ इन विट्रो में रोगी की इम्यूनोसाइट्स की उत्तेजना शामिल है।

आइसोएंटीजन। ये एंटीजन हैं जिनके द्वारा एक ही प्रजाति के व्यक्ति या व्यक्तियों के समूह एक दूसरे से भिन्न होते हैं।

एरिथ्रोसाइट्स, ल्यूकोसाइट्स, प्लेटलेट्स, साथ ही मानव रक्त प्लाज्मा में कई दर्जन प्रकार के आइसोएंटीजन पाए गए हैं।

आनुवंशिक रूप से संबंधित आइसोएंटीजन को समूहों में संयोजित किया जाता है जिन्हें एलबीओ प्रणाली, रीसस आदि कहा जाता है। एबीओ प्रणाली के अनुसार समूहों में लोगों का विभाजन लाल रक्त कोशिकाओं पर एंटीजन की उपस्थिति या अनुपस्थिति पर आधारित होता है, जिन्हें ए और बी नामित किया जाता है। इसके साथ ही सभी लोगों को 4 ग्रुप में बांट दिया गया है. समूह I (0) - कोई एंटीजन नहीं, समूह II (ए) - एरिथ्रोसाइट्स में एंटीजन ए, समूह होता है

III (बी) - एरिथ्रोसाइट्स में एंटीजन बी, समूह IV (एबी) - एरिथ्रोसाइट्स में दोनों एंटीजन होते हैं। चूँकि पर्यावरण में ऐसे सूक्ष्मजीव होते हैं जिनमें समान एंटीजन होते हैं (उन्हें क्रॉस-रिएक्टिंग कहा जाता है), एक व्यक्ति के पास इन एंटीजन के लिए एंटीबॉडी होते हैं, लेकिन केवल वे जो उसके पास नहीं होते हैं। शरीर अपने स्वयं के एंटीजन के प्रति सहनशील होता है। नतीजतन, समूह I के व्यक्तियों के रक्त में एंटीजन ए और बी के प्रति एंटीबॉडी होते हैं, समूह II के व्यक्तियों के रक्त में एंटी-बी होता है, समूह III के व्यक्तियों के रक्त में एंटी-ए होता है, और समूह II के व्यक्तियों के रक्त में एंटी-ए होता है।

समूह IV में A और Vantigens के प्रति एंटीबॉडी शामिल नहीं हैं। जब रक्त या लाल रक्त कोशिकाओं को एक प्राप्तकर्ता में ट्रांसफ़्यूज़ किया जाता है, जिसके रक्त में संबंधित एंटीजन के प्रति एंटीबॉडी होते हैं, तो ट्रांसफ़्यूज़ किए गए असंगत लाल रक्त कोशिकाओं का वाहिकाओं में समूहन होता है, जो प्राप्तकर्ता के सदमे और मृत्यु का कारण बन सकता है। तदनुसार, समूह I (0) के लोगों को सार्वभौमिक दाता कहा जाता है, और समूह IV (AB) के लोगों को सार्वभौमिक प्राप्तकर्ता कहा जाता है। एंटीजन ए और बी के अलावा, मानव एरिथ्रोसाइट्स में अन्य आइसोएंटीजन (एम, एम 2, एन, एन 2) आदि भी हो सकते हैं। इन एंटीजन में कोई आइसोएंटीबॉडी नहीं हैं, और इसलिए, रक्त आधान के दौरान उनकी उपस्थिति को ध्यान में नहीं रखा जाता है।

प्रमुख हिस्टोकम्पैटिबिलिटी कॉम्प्लेक्स के एंटीजन। सभी लोगों और समूह एंटीजन के लिए सामान्य एंटीजन के अलावा, प्रत्येक जीव में एंटीजन का एक अनूठा सेट होता है जो अपने आप में अद्वितीय होता है। ये एंटीजन मानव गुणसूत्र 6 पर स्थित जीनों के एक समूह द्वारा एन्कोड किए जाते हैं और इन्हें प्रमुख हिस्टोकंपैटिबिलिटी कॉम्प्लेक्स एंटीजन कहा जाता है और इन्हें एमएचसी एंटीजन (मेजर हिस्टोकंपैटिबिलिटी कॉम्प्लेक्स) नामित किया जाता है। मानव एमएचसी एंटीजन सबसे पहले ल्यूकोसाइट्स पर खोजे गए थे और इसलिए इसका दूसरा नाम एचएलए (ह्यूमन ल्यूकोसाइट एंटीजन) है। एमएचसी एंटीजन ग्लाइकोप्रोटीन से संबंधित होते हैं और शरीर की कोशिकाओं की झिल्लियों में मौजूद होते हैं, इसके व्यक्तिगत गुणों का निर्धारण करते हैं और प्रत्यारोपण प्रतिक्रियाओं को प्रेरित करते हैं, जिसके लिए उन्हें तीसरा नाम मिला - प्रत्यारोपण एंटीजन। इसके अलावा, एमएचसी एंटीजन किसी भी एंटीजन के प्रति प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया उत्पन्न करने में एक अनिवार्य भूमिका निभाते हैं।

एमएचसी जीन प्रोटीन के तीन वर्गों को कूटबद्ध करते हैं, जिनमें से दो सीधे प्रतिरक्षा प्रणाली के कामकाज से संबंधित हैं और नीचे चर्चा की गई है, और वर्ग III प्रोटीन में पूरक घटक, टीएनएफ साइटोकिन्स और हीट शॉक प्रोटीन शामिल हैं।

क्लास I प्रोटीन शरीर की लगभग सभी कोशिकाओं की सतह पर पाए जाते हैं। इनमें दो पॉलीपेप्टाइड श्रृंखलाएं होती हैं: भारी श्रृंखला गैर-सहसंयोजक रूप से दूसरी श्रृंखला से जुड़ी होती है। भारी श्रृंखला तीन प्रकारों में मौजूद होती है, जो वर्ग एंटीजन के विभाजन को तीन सीरोलॉजिकल समूहों ए, बी और सी में निर्धारित करती है। भारी श्रृंखला कोशिका झिल्ली और उसकी गतिविधि के साथ संपूर्ण संरचना के संपर्क को निर्धारित करती है। श्रृंखला एक माइक्रोग्लोबुलिन है जो सभी समूहों के लिए समान है। प्रत्येक वर्ग I एंटीजन को एक लैटिन अक्षर और इस एंटीजन की क्रम संख्या द्वारा निर्दिष्ट किया जाता है।

क्लास I एंटीजन साइटोटोक्सिक CO8+ लिम्फोसाइटों के लिए एंटीजन की प्रस्तुति सुनिश्चित करते हैं, और प्रत्यारोपण के दौरान किसी अन्य जीव की एंटीजन-प्रस्तुत करने वाली कोशिकाओं द्वारा इस एंटीजन की पहचान से प्रत्यारोपण प्रतिरक्षा का विकास होता है।

एमएचसी वर्ग II एंटीजन मुख्य रूप से एंटीजन-प्रस्तुत करने वाली कोशिकाओं - डेंड्राइटिक कोशिकाओं, मैक्रोफेज और बी लिम्फोसाइट्स पर स्थित होते हैं। मैक्रोफेज और ब्लीम्फोसाइट्स पर, कोशिका सक्रियण के बाद उनकी अभिव्यक्ति तेजी से बढ़ जाती है। कक्षा II एंटीजन को 5 समूहों में विभाजित किया गया है, जिनमें से प्रत्येक में 3 से 20 एंटीजन होते हैं। क्लास I एंटीजन के विपरीत, जो सीरोलॉजिकल परीक्षणों में एंटीबॉडी युक्त सीरा का उपयोग करके पता लगाया जाता है, क्लास II एंटीजन सेल परीक्षणों में सबसे अच्छा पता लगाया जाता है - मानक लिम्फोसाइटों के साथ परीक्षण कोशिकाओं को सह-संवर्धित करके सेल सक्रियण।

माइक्रोबायोलॉजी: व्याख्यान नोट्स केन्सिया विक्टोरोव्ना तकाचेंको

2. सूक्ष्मजीवों के प्रतिजन

2. सूक्ष्मजीवों के प्रतिजन

संक्रामक एंटीजन बैक्टीरिया, वायरस, कवक और प्रोटोजोआ के एंटीजन होते हैं।

निम्नलिखित प्रकार के जीवाणु प्रतिजन मौजूद हैं:

1) समूह-विशिष्ट (एक ही जीनस या परिवार की विभिन्न प्रजातियों में पाया जाता है);

2) प्रजाति-विशिष्ट (एक ही प्रजाति के विभिन्न प्रतिनिधियों में पाया जाता है);

3) प्रकार-विशिष्ट (सीरोलॉजिकल वेरिएंट निर्धारित करें - सेरोवर्स, एंटीजेनोवर्स - एक प्रजाति के भीतर)।

जीवाणु कोशिका में स्थान के आधार पर, निम्न हैं:

1) ओ-एजी-पॉलीसेकेराइड; बैक्टीरिया की कोशिका भित्ति का हिस्सा है। कोशिका भित्ति लिपोपॉलीसेकेराइड की एंटीजेनिक विशिष्टता निर्धारित करता है; यह एक ही प्रजाति के जीवाणुओं के सेरोवर को अलग करता है। O-AG कमजोर रूप से प्रतिरक्षात्मक है। यह ऊष्मीय रूप से स्थिर है (1-2 घंटे तक उबलने को सहन करता है), रासायनिक रूप से स्थिर है (फॉर्मेल्डिहाइड और इथेनॉल के साथ उपचार को सहन करता है);

2) लिपिड ए - हेटेरोडिमर; इसमें ग्लूकोसामाइन और फैटी एसिड होते हैं। इसमें मजबूत सहायक, निरर्थक इम्युनोस्टिमुलेटरी गतिविधि और विषाक्तता है;

3) एन - एजी; बैक्टीरियल फ्लैगेल्ला का हिस्सा है, इसका आधार प्रोटीन फ्लैगेलिन है। गर्मी अस्थिर;

4) के - एजी - बैक्टीरिया की सतह, कैप्सुलर एंटीजन का एक विषम समूह। वे एक कैप्सूल में स्थित होते हैं और कोशिका भित्ति के लिपोपॉलीसेकेराइड की सतह परत से जुड़े होते हैं;

5) बैक्टीरिया के विषाक्त पदार्थ, न्यूक्लियोप्रोटीन, राइबोसोम और एंजाइम।

वायरस प्रतिजन:

1) सुपरकैप्सिड एंटीजन - सतह खोल;

2) प्रोटीन और ग्लाइकोप्रोटीन एंटीजन;

3) कैप्सिड - खोल;

4) न्यूक्लियोप्रोटीन (कोर) एंटीजन।

सभी वायरल एंटीजन टी-निर्भर हैं।

सुरक्षात्मक एंटीजन एंटीजेनिक निर्धारकों (एपिटोप्स) का एक सेट है जो सबसे मजबूत प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया का कारण बनता है, जो शरीर को किसी दिए गए रोगज़नक़ के साथ पुन: संक्रमण से बचाता है।

शरीर में संक्रामक प्रतिजनों के प्रवेश के तरीके:

1) क्षतिग्रस्त और कभी-कभी बरकरार त्वचा के माध्यम से;

2) नाक, मुंह, जठरांत्र संबंधी मार्ग और जननांग पथ की श्लेष्मा झिल्ली के माध्यम से।

हेटेरोएंटीजन विभिन्न प्रजातियों के प्रतिनिधियों के लिए सामान्य एंटीजेनिक कॉम्प्लेक्स हैं या कॉम्प्लेक्स पर सामान्य एंटीजेनिक निर्धारक हैं जो अन्य गुणों में भिन्न होते हैं। हेटेरोएंटीजन के कारण क्रॉस-इम्यूनोलॉजिकल प्रतिक्रियाएं हो सकती हैं।

विभिन्न प्रजातियों के सूक्ष्मजीवों और मनुष्यों में सामान्य एंटीजन होते हैं जो संरचना में समान होते हैं। इन घटनाओं को एंटीजेनिक मिमिक्री कहा जाता है।

सुपरएंटीजन एंटीजन का एक विशेष समूह है, जो बहुत छोटी खुराक में, पॉलीक्लोनल सक्रियण और बड़ी संख्या में टी लिम्फोसाइटों के प्रसार का कारण बनता है। सुपरएंटीजन बैक्टीरियल एंटरोटॉक्सिन, स्टेफिलोकोकल, हैजा टॉक्सिन और कुछ वायरस (रोटावायरस) हैं।

माइक्रोबायोलॉजी पुस्तक से: व्याख्यान नोट्स लेखक तकाचेंको केन्सिया विक्टोरोव्ना

माइक्रोबायोलॉजी पुस्तक से लेखक तकाचेंको केन्सिया विक्टोरोव्ना

व्याख्यान संख्या 4. सूक्ष्मजीवों की आनुवंशिकी। बैक्टीरियोफेज 1. बैक्टीरिया की वंशानुगत सामग्री का संगठन बैक्टीरिया के वंशानुगत तंत्र को एक गुणसूत्र द्वारा दर्शाया जाता है, जो एक डीएनए अणु है, यह सर्पिल होता है और एक अंगूठी में मुड़ा होता है। यह एक बिंदु पर एक वलय है

पारिस्थितिकी पुस्तक से मिशेल पॉल द्वारा

व्याख्यान संख्या 11. एंटीजन 1. एंटीजन के गुण और प्रकार एंटीजन उच्च आणविक यौगिक हैं। जब वे शरीर में प्रवेश करते हैं, तो वे एक प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया का कारण बनते हैं और इस प्रतिक्रिया के उत्पादों के साथ बातचीत करते हैं: एंटीबॉडी और सक्रिय लिम्फोसाइट्स। एंटीजन का वर्गीकरण।1. द्वारा

जीव विज्ञान पुस्तक से [एकीकृत राज्य परीक्षा की तैयारी के लिए संपूर्ण संदर्भ पुस्तक] लेखक लर्नर जॉर्जी इसाकोविच

2. सूक्ष्मजीवों का वर्गीकरण और नामकरण जीवाणु वर्गीकरण की मुख्य वर्गीकरण इकाई प्रजाति है। एक प्रजाति व्यक्तियों का एक विकासात्मक रूप से स्थापित समूह है जिसका एक ही जीनोटाइप होता है, जो मानक परिस्थितियों में समान रूपात्मक रूप से प्रकट होता है।

जर्नी टू द लैंड ऑफ माइक्रोब्स पुस्तक से लेखक बेटिना व्लादिमीर

सूक्ष्मजीवों की पारिस्थितिकी लोग बड़े आकार से प्रभावित होते हैं। शायद इसीलिए, जब हम जुरासिक काल को याद करते हैं, तो सबसे पहले हम उन विशाल डायनासोरों की कल्पना करते हैं जिन्होंने कभी हमारे ग्रह पर "शासन" किया था। हालाँकि, यदि कोई जीव पृथ्वी पर "शासन" करता है, तो ये हैं

माइक्रोबायोलॉजी के बारे में लोकप्रिय पुस्तक से लेखक बुखार मिखाइल

ऑन द एज ऑफ़ लाइफ़ पुस्तक से लेखक डेनकोव वेसेलिन ए.

6. सूक्ष्मजीवों का जीवन और मृत्यु जीवन सी. बर्नार्ड की रचना है गति में सूक्ष्मजीव लीउवेनहॉक ने रॉयल सोसाइटी ऑफ लंदन को उनके द्वारा देखे गए "छोटे जानवरों" के बारे में रिपोर्ट करते हुए लिखा कि वे बहुत तेज़ी से चलने की अपनी क्षमता से प्रतिष्ठित हैं। जैसा कि हम पहले ही कह चुके हैं

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सूक्ष्मजीवों की वृद्धि और प्रजनन जैसा कि 19वीं सदी के प्रसिद्ध फ्रांसीसी शरीर विज्ञानी क्लॉड बर्नार्ड ने कहा था, जीवन एक रचना है। जीवित जीव निर्जीव प्रकृति से मुख्य रूप से इस मायने में भिन्न होते हैं कि वे बढ़ते हैं और प्रजनन करते हैं। ऐसे में उनकी वृद्धि और प्रजनन सबसे अच्छी तरह से देखा जाता है

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सूक्ष्मजीवों के जीवन की सीमाएँ सूक्ष्मजीवों का जीवन और प्रजनन कई बाहरी कारकों पर निर्भर करता है। इनमें सबसे पहले, परिवेश का तापमान शामिल है। हमें ज्ञात सबसे कम तापमान है जिस पर अणुओं और परमाणुओं की तापीय गति रुक ​​जाती है

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सूक्ष्मजीवों की सहनशक्ति सीमा तो, हम पहले ही जान चुके हैं कि सूक्ष्मजीव महत्वपूर्ण तापमान में उतार-चढ़ाव को सहन करते हैं, जो मनुष्यों की तुलना में बहुत अधिक है। आइए देखें कि वे अन्य प्रतिकूल परिस्थितियों पर कैसे प्रतिक्रिया करते हैं। समुद्र तल पर और 45° भौगोलिक तापमान पर वायुदाब

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सूक्ष्मजीवों की मित्रता रोगाणुओं की दुनिया के सबसे विविध प्रतिनिधियों के बीच, "मैत्रीपूर्ण", सहजीवी संबंध विकसित हुए हैं। उदाहरण के लिए, कुछ प्रोटोजोआ और शैवाल के बीच संबंध दिलचस्प हैं। सिलिअट्स की कोशिकाओं में अक्सर सहजीवी हरा या होता है

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अध्याय 12 सूक्ष्मजीवों की व्यापकता हम अंधकार, और अंधकार, और अंधकार हैं। A. ब्लॉक सूक्ष्मजीव हर जगह हैं। हवा में, पानी में, मिट्टी में - और हर जगह इनकी बहुतायत है। यह कहना पर्याप्त होगा कि राइजोस्फीयर के केवल एक घन सेंटीमीटर में (यह सीधे मिट्टी का हिस्सा है

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सूक्ष्मजीवों की दुनिया में और पौधों की दुनिया में एनाबियोसिस और शीतकालीन निष्क्रियता प्रकृति में, एनाबियोसिस केवल पशु जीवों का पेटेंट नहीं है। प्रोकैरियोटे साम्राज्य के सूक्ष्मजीवों के बीच भी इसका व्यापक रूप से प्रतिनिधित्व किया जाता है, जिसमें सभी प्रकार के बैक्टीरिया और नीले-हरे शैवाल शामिल हैं। एनाबियोसिस

सूक्ष्मजीवों की एंटीजेनिक संरचना बहुत विविध है। सूक्ष्मजीवों को सामान्य, या समूह, और विशिष्ट, या विशिष्ट, एंटीजन में विभाजित किया गया है।

समूह एंटीजन एक ही जीनस से संबंधित दो या दो से अधिक प्रकार के रोगाणुओं के लिए सामान्य होते हैं, और कभी-कभी विभिन्न जेनेरा से संबंधित होते हैं। इस प्रकार, साल्मोनेला जीनस के कुछ प्रकारों में सामान्य समूह एंटीजन होते हैं; टाइफाइड बुखार के रोगजनकों में पैराटाइफाइड ए और पैराटाइफाइड बी (0-1.12) के रोगजनकों के साथ सामान्य समूह एंटीजन होते हैं।

विशिष्ट एंटीजन केवल किसी दिए गए प्रकार के सूक्ष्म जीव में मौजूद होते हैं, या यहां तक ​​कि किसी प्रजाति के भीतर केवल एक निश्चित प्रकार (संस्करण) या उपप्रकार में भी मौजूद होते हैं। विशिष्ट एंटीजन का निर्धारण जीनस, प्रजाति, उप-प्रजाति और यहां तक ​​कि प्रकार (उपप्रकार) के भीतर रोगाणुओं को अलग करना संभव बनाता है। इस प्रकार, जीनस साल्मोनेला के भीतर, 2000 से अधिक प्रकार के साल्मोनेला को एंटीजन के संयोजन से विभेदित किया जाता है, और शिगेला फ्लेक्सनर उप-प्रजाति में 5 सीरोटाइप (सेरोवेरिएंट) होते हैं।

माइक्रोबियल कोशिका में एंटीजन के स्थानीयकरण के आधार पर, माइक्रोबियल सेल के शरीर से जुड़े दैहिक एंटीजन, कैप्सुलर एंटीजन - सतह या आवरण एंटीजन, और फ्लैगेला में स्थित फ्लैगेलर एंटीजन के बीच अंतर किया जाता है।

सोमैटिक, ओ-एंटीजन(जर्मन ओहने हाउच से - बिना सांस लिए), माइक्रोबियल कोशिका के शरीर से जुड़ा हुआ। ग्राम-नकारात्मक बैक्टीरिया में, ओ-एंटीजन लिपिडोपॉलीसेकेराइड-प्रोटीन प्रकृति का एक जटिल परिसर है। यह अत्यधिक विषैला होता है और इन जीवाणुओं के लिए एक एंडोटॉक्सिन है। कोकल संक्रमण, हैजा विब्रियोस, ब्रुसेलोसिस के प्रेरक एजेंट, तपेदिक और कुछ एनारोबेस के प्रेरक एजेंटों में, पॉलीसेकेराइड एंटीजन को माइक्रोबियल कोशिकाओं के शरीर से अलग किया जाता है, जो बैक्टीरिया के प्रकार की विशिष्टता निर्धारित करते हैं। एंटीजन के रूप में, वे शुद्ध रूप में और लिपिड के साथ संयोजन में सक्रिय हो सकते हैं।

फ्लैगेलेट्स, एच-एंटीजन(जर्मन हाउच से - सांस), प्रकृति में प्रोटीन हैं और गतिशील रोगाणुओं के फ्लैगेल्ला में पाए जाते हैं। फ्लैगेलर एंटीजन गर्मी और फिनोल द्वारा तेजी से नष्ट हो जाते हैं। वे फॉर्मेल्डिहाइड की उपस्थिति में अच्छी तरह से संरक्षित रहते हैं। इस संपत्ति का उपयोग एग्लूटीनेशन प्रतिक्रिया के लिए मारे गए डायग्नोस्टिक सह के उत्पादन में किया जाता है, जब फ्लैगेल्ला को संरक्षित करना आवश्यक होता है।

कैप्सुलर, के - एंटीजन, - माइक्रोबियल कोशिका की सतह पर स्थित होते हैं और इन्हें सतही, या आवरण भी कहा जाता है। इनका सबसे अधिक विस्तार से अध्ययन आंतों के परिवार के रोगाणुओं में किया गया है, जिनमें Vi-, M-, B-, L- और A-एंटीजन प्रतिष्ठित हैं। इनमें से Vi एंटीजन अहम है. इसे सबसे पहले टाइफाइड बैक्टीरिया के अत्यधिक विषैले उपभेदों में खोजा गया था और इसे विषाणु प्रतिजन नाम दिया गया था। जब किसी व्यक्ति को O- और Vi-एंटीजन के कॉम्प्लेक्स से प्रतिरक्षित किया जाता है, तो टाइफाइड बुखार के खिलाफ उच्च स्तर की सुरक्षा देखी जाती है। Vi एंटीजन 60°C पर नष्ट हो जाता है और O एंटीजन की तुलना में कम विषैला होता है। यह अन्य आंतों के रोगाणुओं, जैसे ई. कोली, में भी पाया जाता है।



रक्षात्मक(लैटिन प्रोटेक्टियो से - संरक्षण, सुरक्षा), या सुरक्षात्मक, एंटीजन जानवरों के शरीर में एंथ्रेक्स रोगाणुओं द्वारा बनता है और एंथ्रेक्स रोग के दौरान विभिन्न स्रावों में पाया जाता है। सुरक्षात्मक एंटीजन एंथ्रेक्स सूक्ष्म जीव द्वारा स्रावित एक्सोटॉक्सिन का हिस्सा है और प्रतिरक्षा के विकास को प्रेरित करने में सक्षम है। इस एंटीजन की शुरूआत के जवाब में, पूरक-फिक्सिंग एंटीबॉडी का निर्माण होता है। एक जटिल सिंथेटिक माध्यम पर एंथ्रेक्स सूक्ष्म जीव को विकसित करके एक सुरक्षात्मक एंटीजन प्राप्त किया जा सकता है। सुरक्षात्मक एंटीजन से एंथ्रेक्स के खिलाफ एक अत्यधिक प्रभावी रासायनिक टीका तैयार किया गया था। सुरक्षात्मक एंटीजन उन रोगजनकों में भी पाए गए हैं जो प्लेग, ब्रुसेलोसिस, टुलारेमिया और काली खांसी का कारण बनते हैं।

पूर्ण प्रतिजनशरीर में एंटीबॉडी के संश्लेषण या लिम्फोसाइटों के संवेदीकरण का कारण बनता है और विवो और इन विट्रो दोनों में उनके साथ प्रतिक्रिया करता है। पूर्ण विकसित एंटीजन को सख्त विशिष्टता की विशेषता होती है, यानी वे शरीर को केवल विशिष्ट एंटीबॉडी का उत्पादन करने के लिए प्रेरित करते हैं जो केवल दिए गए एंटीजन के साथ प्रतिक्रिया करते हैं। इन एंटीजन में पशु, पौधे और जीवाणु मूल के प्रोटीन शामिल हैं।

दोषपूर्ण एंटीजन (घटित होता है) जटिल कार्बोहाइड्रेट, लिपिड और अन्य पदार्थ हैं जो एंटीबॉडी के निर्माण में सक्षम नहीं हैं, लेकिन उनके साथ एक विशिष्ट प्रतिक्रिया में प्रवेश करते हैं। हैप्टेंस पूर्ण विकसित एंटीजन के गुण तभी प्राप्त करते हैं जब उन्हें प्रोटीन के साथ संयोजन में शरीर में पेश किया जाता है।

हैप्टेन के विशिष्ट प्रतिनिधि लिपिड, पॉलीसेकेराइड, न्यूक्लिक एसिड, साथ ही सरल पदार्थ हैं: पेंट, एमाइन, आयोडीन, ब्रोमीन, आदि।



संक्रामक रोगों से बचाव की एक विधि के रूप में टीकाकरण। टीकाकरण के विकास का इतिहास. टीके। टीकों के लिए आवश्यकताएँ. टीके बनाने की संभावना निर्धारित करने वाले कारक।

टीके जैविक रूप से सक्रिय तैयारी हैं जो संक्रामक रोगों और इम्यूनोपैथोलॉजी की अन्य अभिव्यक्तियों के विकास को रोकते हैं। टीकों के उपयोग का सिद्धांत सक्रिय रूप से प्रतिरक्षा बनाना और, परिणामस्वरूप, रोग के विकास के लिए प्रतिरोध बनाना है। टीकाकरण से तात्पर्य रोग प्रतिरोधक क्षमता बढ़ाने के लिए टीके लगाकर जनसंख्या को कृत्रिम रूप से प्रतिरक्षित करने के उपायों से है। टीकाकरण का लक्ष्य एक विशिष्ट रोगज़नक़ के खिलाफ एक प्रतिरक्षाविज्ञानी स्मृति बनाना है।

निष्क्रिय और सक्रिय टीकाकरण हैं। अन्य जीवों से प्राप्त इम्युनोग्लोबुलिन का परिचय निष्क्रिय टीकाकरण है। इसका उपयोग चिकित्सीय और रोगनिरोधी दोनों उद्देश्यों के लिए किया जाता है। टीका प्रशासन सक्रिय टीकाकरण है। सक्रिय और निष्क्रिय टीकाकरण के बीच मुख्य अंतर प्रतिरक्षाविज्ञानी स्मृति का निर्माण है।

इम्यूनोलॉजिकल मेमोरी शरीर में दोबारा प्रकट होने वाले विदेशी एजेंटों को त्वरित और अधिक प्रभावी ढंग से हटाने को सुनिश्चित करती है। इम्यूनोलॉजिकल मेमोरी का आधार टी- और बी-मेमोरी कोशिकाएं हैं।

पहले टीके को इसका नाम इसी शब्द से मिला चेचक(काउपॉक्स) मवेशियों की एक वायरल बीमारी है। अंग्रेजी डॉक्टर एडवर्ड जेनर ने सबसे पहले 1796 में चेचक के रोगी के हाथ पर छाले से प्राप्त चेचक के टीके का प्रयोग बालक जेम्स फिप्स पर किया था। लगभग 100 साल बाद (1876-1881) ही लुई पाश्चर ने टीकाकरण का मुख्य सिद्धांत तैयार किया - विषाणुजनित उपभेदों के विरुद्ध प्रतिरक्षा के निर्माण के लिए सूक्ष्मजीवों की कमजोर तैयारी का उपयोग।

कुछ जीवित टीके सोवियत वैज्ञानिकों द्वारा बनाए गए थे, उदाहरण के लिए, पी. एफ. ज़ड्रोडोव्स्की ने 1957-59 में टाइफस के खिलाफ एक टीका बनाया था। फ्लू का टीका 1960 में वैज्ञानिकों के एक समूह द्वारा बनाया गया था: ए. ए. स्मोरोडिंटसेव, वी. डी. सोलोविओव, वी. एम. ज़दानोव। पी. ए. वर्शिलोवा ने 1947-51 में एक जीवित ब्रुसेलोसिस टीका बनाया।

वैक्सीन को निम्नलिखित आवश्यकताओं को पूरा करना होगा:

● एंटीजन प्रसंस्करण और प्रस्तुति में शामिल कोशिकाओं को सक्रिय करें;
● इसमें टी- और टी-कोशिकाओं के लिए एपिटोप्स होते हैं जो सेलुलर और ह्यूमरल प्रतिक्रिया प्रदान करते हैं;
● हिस्टोकम्पैटिबिलिटी एंटीजन द्वारा बाद में प्रभावी प्रस्तुति के साथ प्रक्रिया करना आसान;
● प्रभावकारी टी कोशिकाओं, एंटीबॉडी-उत्पादक कोशिकाओं और संबंधित मेमोरी कोशिकाओं के निर्माण को प्रेरित करना;
● लंबे समय तक रोग के विकास को रोकना;
● हानिरहित हो, अर्थात गंभीर बीमारी या दुष्प्रभाव का कारण न बने।

टीकाकरण की प्रभावशीलता वास्तव में टीकाकरण करने वाले लोगों का प्रतिशत है जिन्होंने विशिष्ट प्रतिरक्षा बनाकर टीकाकरण का जवाब दिया। इस प्रकार, यदि किसी निश्चित टीके की प्रभावशीलता 95% है, तो इसका मतलब है कि टीका लगाए गए 100 लोगों में से 95 विश्वसनीय रूप से सुरक्षित हैं, और 5 को अभी भी बीमारी का खतरा है। टीकाकरण की प्रभावशीलता कारकों के तीन समूहों द्वारा निर्धारित की जाती है। कारक जो वैक्सीन की तैयारी पर निर्भर करते हैं: वैक्सीन के गुण, जो इसकी इम्युनोजेनेसिटी निर्धारित करते हैं (जीवित, निष्क्रिय, कणिका, सबयूनिट, इम्युनोजेन और सहायक की मात्रा, आदि); वैक्सीन उत्पाद की गुणवत्ता, यानी इम्यूनोजेनेसिटी वैक्सीन की समाप्ति के कारण या इस तथ्य के कारण नष्ट नहीं होती है कि इसे अनुचित तरीके से संग्रहीत या परिवहन किया गया था। कारक जो टीका लगाए जाने वाले व्यक्ति पर निर्भर करते हैं: आनुवंशिक कारक जो विशिष्ट प्रतिरक्षा विकसित करने की मौलिक संभावना (या असंभव) निर्धारित करते हैं; उम्र, क्योंकि प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया प्रतिरक्षा प्रणाली की परिपक्वता की डिग्री से सबसे निकट से निर्धारित होती है; स्वास्थ्य की स्थिति "सामान्य तौर पर" (विकास, विकास और विकृतियाँ, पोषण, तीव्र या पुरानी बीमारियाँ, आदि); प्रतिरक्षा प्रणाली की पृष्ठभूमि स्थिति - मुख्य रूप से जन्मजात या अधिग्रहित इम्युनोडेफिशिएंसी की उपस्थिति।

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